蜜蜂白垩病诊断技术 GBT 35908-2018.pdf

GB/T35908-20185仪器设备5.1光学显微镜。5.2恒温培养箱(35土1).5.3A2型二级生物安全柜。5.4冰箱(28和-20)。5.5PCR仪.5.6电泳仪。5.7冷冻离心机。5.8凝胶成像系统。6临床诊断6.1流行病学西方蜜蜂的幼虫易患蜜蜂白垩病，病虫和病菌污染的饲料、蜂具是主要的传染源。菌丝和孢子均具有侵染性，它们可由成年蜂或蜂螨体表携带并在蜂群内或蜂群间传播。白垩病主要引起老熟幼虫和封盖幼虫死亡，3日龄4日龄雄蜂幼虫和4日龄5日龄工蜂幼虫最易感染白垩病，蜂场内蜂群的发病率可达10%50%，幼虫感染率为5%一40%，成年蜂虽不易感染，但是病原的携带者和传播者。白垩病的发生有明显的季节性，多发生在春夏的6月8月高温、高湿季节。凡是日照长、地势高燥的地方，白垩病发病率低，一般为3%5%，或根本不发病：而气温高、湿度大、光照不足的地方，白垩病危害严重，6.2箱外观察患病蜂群的巢门口可见被工蜂拖出的幼虫干尸，质硬，有的干尸呈苍白色，以葵花仁状，表面有一层绒毛膜，掰开幼虫干尸可见内心为浅棕色：有的干尸为部分或全部黑色，似西瓜子状，表面有一层黑色颗粒状物质。（参见附录C)6.3开箱检查从患病蜂样中提出封盖子脾，在已封盖的部分有呈星点式分布被工蜂咬开的巢房，可见内有向一侧测贴壁的幼虫干尸，形态完整，质地柔韧，无光泽，无臭味，用镊子取出后，可见有的为白色，有的为部分或全部黑色。健康的蜜蜂幼虫是呈有光泽、珍珠样外观。（参见附录D)6.4结果判定结合该病的流行特点，若蜂群出现6.1和6,2的典型症状，即可判定为临床诊断阳性。7实验室诊断7.1采样根据临床诊断结果，选择疑似感染的蜂群采集蜜蜂幼虫样品。采样时，应尽量无菌采集变色或死亡幼虫，样品保存于2一8的条件下，24内送实脸室检测。