论著·基础研究ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－８３４８．２０２３．０４．００２网络首发ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／／５０．１０９７．Ｒ．２０２２１２０５．１７２８．００６．ｈｔｍｌ（２０２２－１２－０６）红霉素抑制ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ通路增加Ｎｒｆ２蛋白表达减轻烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应的效果研究＊孙雪皎，陈琳△，陈慧，李程，蓝官引（柳州市人民医院呼吸与危重症医学科，广西柳州５４５００６）［摘要］目的研究红霉素通过抑制ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ通路增加Ｎｒｆ２蛋白表达从而减轻烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应的效果。方法以人单核细胞株（Ｕ９３７）为研究对象，采用烟草烟雾提取物（ＣＳＥ）制造细胞氧化应激模型，分为空白对照（ＮＣ）组、ＣＳＥ组（ＣＳＥ刺激细胞）、红霉素组（红霉素预孵育＋ＣＳＥ刺激细胞）、抑制剂组（ＰＩ３Ｋ通路抑制剂ＬＹ２９４００２预孵育＋ＣＳＥ刺激细胞）等４组。根据转染Ｎｒｆ２－ｓｉＲＮＡ干扰细胞中Ｎｒｆ２蛋白的表达，分为ｓｉＲＮＡＮＣ对照组、ｓｉＲＮＡＮＣ＋ＣＳＥ组、ＮＣ＋ＣＳＥ＋红霉素组、Ｎｒｆ２－ｓｉＲＮＡ组、Ｎｒｆ２－ｓｉＲＮＡ＋ＣＳＥ组、Ｎｒｆ２－ｓｉＲＮＡ＋ＣＳＥ＋红霉素组等６组。采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测各组细胞中ＡｋｔｍＲＮＡ、Ｎｒｆ２ｍＲＮＡ的表达。采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测各组细胞内Ａｋｔ、ＰＡｋｔ、Ｎｒｆ２、核因子（ＮＦ）－κＢｐ６５蛋白的水平。结果与空白对照组比较，ＣＳＥ组白细胞介素－８（ＩＬ－８）水平明显升高，ＰＡｋｔ及ＮＦ－κＢｐ６５蛋白的表达水平上升，Ｎｒｆ２蛋白及Ｎｒｆ２ｍＲＮＡ的表达水平下降。红霉素组和抑制剂组ＩＬ－８水平较ＣＳＥ组下降，ＰＡｋｔ及ＮＦ－κＢｐ６５蛋白的表达水平下降，Ｎｒｆ２蛋白及Ｎｒｆ２ｍＲＮＡ的表达水平有所升高。不同细胞氧化应激模型组ＡｋｔｍＲＮＡ水平比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。Ｎｒｆ２－ｓｉＲＮＡ组Ｎｒｆ２的表达水平较ｓｉＲＮＡＮＣ组明显降低，但与Ｎｒｆ２－ｓｉＲＮＡ＋ＣＳＥ组、Ｎｒｆ２－ｓｉＲＮＡ＋ＣＳＥ＋红霉素组比较无明显差异；ｓｉＲＮＡＮＣ－ＣＳＥ组Ｎｒｆ２表达水平下降，而ＮＣ－ＣＳＥ＋红霉素组表达水平上升；ｓｉＲＮＡＮＣ－ＣＳＥ组及Ｎｒｆ２－ｓｉＲＮＡ＋ＣＳＥ组ＮＦ－κＢｐ６５及ＰＡｋｔ表达水平上升，但ｓｉ...
