粮油检验 实际与理论ECN42甘三酯含量差值的测定 GBT 37512-2019.pdf

GB/T3751220194.11注射器：10L。4.12检测器：示差折光检测器。最高灵敏度折光指数至少是10-。4.13不锈钢色谱柱：柱长250mm,柱内径4.5mm,填料粒径5m,含碳22%23%十八烷基键合硅胶。柱效宜确保三油酸甘油酯与邻近保留时间的甘三酯色谱峰分离良好。4.14样品瓶：2mL,带孔旋盖(Te1on垫)。5试剂除另有说明外，所用试剂均为分析纯。5.1石油醚：4060，色谱纯，或正己烷。5.2乙醚：无过氧化物，新蒸榴。5.3洗脱液：用于柱色谱纯化油脂，石油醚：乙醚=87：13（体积比）。5.4硅胶：70目230目，Merck7734,含水量5%（质量分数）。5.5玻璃棉。5.6丙丽：色谱级。5.7乙睛或丙腊：色谱级。5.8流动相：乙睛十丙酮（可调节两者比例获得满意分离效果；初始50：50）或丙腈。应脱气，并可能需多次脱气直至不影响分离。5.9溶剂：丙酮。5.10甘三酯参考物质：商品化甘三酯（三棕榈酸甘油酯、三油酸甘三酯等），根据等效碳数确定保留时间；或参考附录A中低亚油酸橄榄油（橄榄油）、高亚油酸橄榄油（混有籽油的橄榄油）的液相色谱图（参见图A.1、图A.2)。注1：洗脱顺序可由计算的等效碳数确定，等效碳数(ECN)定义为ECN=CN一2，其中CN为碳数，刀为双键数：若考虑双键米源，计算等效碳数更加精确。如，L”,分捌是油酸，亚油酸和亚麻酸双键个数，等效碳数可依据下式计算：ECN=CN-dono-dinL-dunu其中系数d。d和d可由甘三酯参考物质计算得到。在本标准规定条件下，关系式近似于：ECN=CN-2.60no-2.35n-2.17n1注2：计算几种甘三酯参考物质相对于三油酸甘油酯的选择因子：a=RT/RT三角限南S其中调整保留时间RT=RT一RTmNga与f(双键数)关系图可确定所有脂肪酸甘油酯（包括甘三酯参考物质）的保留值，参见图B.1。5.11固相萃取柱(SPE):硅胶1g,6mL。6操作步骤6.1试样制备6.1.1纯化必要性为避免干扰物质引起假阳性结果，样品应进行纯化。6.1.2传统柱色谱纯化6.1.2.1色谱柱的制备向色普柱(4,3)中加入30mL洗脱液(5.3)，然后加入少许玻璃棉(5.5)，用玻璃棒(4.5)将玻璃棉压