王瑞官等/核纤层蛋白B1通过影响端粒酶活性调控肝癌细胞生长ChineseJournalofBiotechnologyhttp://journals.im.ac.cn/cjbcnApr.25,2023,39(4):1609-1620DOI:10.13345/j.cjb.220625©2023ChinJBiotech,Allrightsreserved资助项目:解放军总医院第八医学中心课题(2021MS003)ThisworkwassupportedbytheProjectoftheEighthMedicalCenterofPeople’sLiberationArmyGeneralHospital(2021MS003).*Correspondingauthors.E-mail:LIJiangbo,ljb412bio@outlook.com;QINLingmei,qlm1846632889@outlook.comReceived:2022-08-06;Accepted:2022-10-20;Publishedonline:2022-10-241609生物工程学报核纤层蛋白B1通过影响端粒酶活性调控肝癌细胞生长王瑞官1,2,陈思3,孙志佳4,王诗昆5,王杰6,秦玲玫7*,李江波7*1中国人民解放军总医院肝胆胰腺外科医学部,北京1008532中国人民解放军总医院第八医学中心肝胆外科,北京1000913湖南省职业病防治院妇产科,湖南长沙4100214中国人民解放军空军特色医学中心放疗科,北京1001425新疆军区信息通信旅,西藏阿里8594996石河子大学医学院,新疆石河子8320007军事科学院军事医学研究院生物工程研究所,北京100089王瑞官,陈思,孙志佳,王诗昆,王杰,秦玲玫,李江波.核纤层蛋白B1通过影响端粒酶活性调控肝癌细胞生长[J].生物工程学报,2023,39(4):1609-1620.WANGRuiguan,CHENSi,SUNZhijia,WANGShikun,WANGJie,QINLingmei,LIJiangbo.LaminB1regulatesthegrowthofhepatocellularcarcinomacellsbyinfluencingtelomeraseactivity[J].ChineseJournalofBiotechnology,2023,39(4):1609-1620.摘要:核纤层蛋白B1(nuclearlaminaproteinB1,LMNB1)高表达于肝癌组织中,通过敲低LMNB1探讨其对肝癌细胞增殖的影响及其机制。利用siRNA在肝癌细胞中敲低LMNB1,Westernblotting检测敲低效果,使用端粒重复序列扩增法(telomericrepeatamplificationprotocolassay,TRAP)检测其端粒酶活性变化。利用实时定量聚合酶链反应(quantitativereal-timepolymerasechainreaction,qPCR)检测其端粒长度变化。并通过CCK-8、克隆形成、Transwell、划痕实验检测其生长,侵袭和迁移能力变化。利用慢病毒系统构建稳定敲低LMNB1的HepG2细胞,检测其端粒长度及端粒酶活性变化,采用SA-β-gal衰老染色检测细胞衰老情况,通过裸鼠皮下成瘤实验及对肿瘤后续的组化染色,SA-β-gal衰老染色,端粒荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)检测其对成瘤性的影响。最后...