牛奶和奶粉中维吉尼霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 GBT 22991-2008.pdf

GB/T22991-2008前言本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局，中华人民共和国辽宁出入境检验检度局。本标准主要起草人：宋文斌、李一尘、茧振霖、隋凯、赵景红、薛大芳、张华一，李振荣、庞国芳。GB/T22991-20087测定步骤7.1提取7.1.1原料乳样品称取原料乳5.00mL,精确到0.01mL,放入50mL聚丙烯离心管中，加入10mL的甲醇十乙腈溶液(1+1)涡旋1min,高速振荡10min,离心15min(5000r/min),将上清液转移至40mL离心管中。再向残渣中加入2mL甲醇十乙腈溶液(1十1)涡旋5s,高速振荡5min,在5000r/min下离心10min。合并两次上清液与40mL离心管中。加入15mL的0.01mol/L磷酸二氢铵溶液(4.9)，高速振荡5min,以5000r/min离心10min,用滤纸过滤至150mL的鸡心瓶中，加入80mL磷酸二氢铵缓冲液(4.9)混匀待净化。7.1.2纯奶粉样品称取纯奶粉0.625g,精确到0.001g,放入50mL聚丙烯离心管中加水4.375g,超声溶解得到复原乳。加入10mL的甲醇十乙情溶液(1十1)涡旋1mi,以下步骤同原料乳样品。7.2净化依次用5mL乙腈、5mL水和5mL的磷酸二氢铵(4.9)洗涤活化固相萃取柱(5.15)。在柱上装上心液器(5.17)，将样液(7.1)过柱，移去贮液器(5.17)。依次用2mL水，10mL水十乙腈溶液(4+1)，2mL水和10mL水十甲醇溶液(13+7)洗柱，弃去全部流出液。最后用5mL水十甲醇溶液(9十11)洗涤维吉尼霉素M1,收集洗脱液到15mL的玻璃离心管中，将10mL三氣甲烷(4.5)加入洗脱液中，振荡5min,离心10min(5000r/min)。用一次性移液管定量收集三氯甲烷层到10mL离心管中，在40条件下氮吹至干。再向离心管中加入500L甲醇，超声5mi,加入500L甲酸铵缓冲液(4.11),高速涡旋5s。样液用0.2m的滤膜过滤到样品瓶中，供液相色谐-串联质谱仪测定。7.3色谱测定7.3.1液相色谱条件液相色谱条件如下：a)色谱柱：SunFire Cis,5m,150mmX2.1mm(内径)或相当者：b)柱温：40；c)进样量：30Ld)色谱柱总流量：300L/mine)流动相及梯度见表1。表1流动相及梯度时间/min流动相A/%流动相B/%0.0093720.00406026.00406028.0093735.00937.3.2质谱条件质谱条件如下：)离子源：电喷雾离子源：b)扫描方式：正离子扫描：c)检测方式：多反应检测：d)电喷雾电压(IS):5000V:e)雾化气压力(CAS1):517.1kPa;