第1页共7页植物组织中淀粉含量的测定一、原理淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖，在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖，然后在浓硫酸的作用下，使单糖脱水生成糠醛类化合物，利用蒽酮试剂与糠醛化合物的显色反响，即可进行比色测定。二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料任何植物材料。（二）试剂浓硫酸（比重1.84）。9.2mol/lhclo4。2%蒽酮试剂，同实验24。（三）仪器设备电子天平，容量瓶。20230ml4个、50ml2个，漏斗，小试管假设干支，电炉，刻度吸管0.5ml1支、2.0ml3支、5ml4支，分光光度计，记号笔。三、实验步骤1.标准曲线制作取小试管11支从0～2023编号，按表24-3参加溶液和蒸馏水。以下步骤按苯酚法或蒽酮法均可，见方法一或方法二，绘制相应的标准曲线。表24-3各试管参加标准液和蒸馏水量管号01～23～45～67～89～2023淀粉标准液（ml）00.40.81.21.62.0蒸馏水（ml）2.01.61.20.80.40淀粉含量（mg）04202301202302022.样品提取称取50～20230mg粉碎过20230目筛的烘干样品，置于15ml刻度试管中，参加6～7ml80％乙醇，在80℃水浴中提取30min，取出离心（3000rpm）5min，收集上清液。重复提取两次（各2023min）第2页共7页同样离心，收集三次上清液合并于烧杯，置于85℃恒温水浴，使乙醇蒸发至2～3ml，转移至50ml容量瓶，以蒸馏水定容，供可溶性糖的测定。向沉淀中加蒸馏水3ml，搅拌均匀，放入沸水浴中糊化15min。冷却后，参加2ml冷的9.2mol/l高氯酸，不时搅拌，提取15min后加蒸馏水至2023ml，混匀，离心2023min，上清液倾入50ml容量瓶。再向沉淀中参加2ml4.6mol/l高氯酸，搅拌提取15min后加水至2023ml，混匀后离心2023min，收集上清于容量瓶。然后用水洗沉淀1～2次，离心，合并离心液于50ml容量瓶用蒸馏水定容供测淀粉用。3.测定取待测样品提取液1.0ml于试管中，再加蒽酮试剂5ml，快速摇匀，然后在沸水浴中煮2023min，取出冷却，在620nm波长下，用空白调零测定光密度，从标准曲线查出淀粉含量（mg）。四、结果计算：含量（%）=20230xcxvt/v1x202300xw式中。c——从标准曲线查得淀粉量，mg。vt——样品提取液总体积，ml。v1——显色时取样品液量，ml。w——样品重，g。0.9——由葡萄糖换算为淀粉的系数。Ⅱ碘-淀粉比色法一、原理对于淀粉含量较少的植株样品，也可采用碘–淀粉比色法。淀粉在加热情况下能溶于硝酸钙溶液中，当碘化钾和硝酸钙共存时，碘能以碘–淀粉蓝色化合物沉淀全部淀粉。将此沉淀溶于碱液，并在酸性条件下与碘作用形成蓝色溶...
