猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法 GBT 35912-2018.pdf

GB/T35912-2018猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法1范围本标准规定了猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测的操作方法。本标准适用于猪繁殖与呼吸道综合征病毒美洲型毒株核後检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实险室用水规格和试脸方法GB/T25172猪常温精液生产与保存技术规范3缩略语下列缩略语适用于本文件。Rea-time RT-PCR:荧光反转录聚合酶链式反应(rea-time reverse transcript polymerase chain re-action)C,值：每个反应管内的荧光信号量达到设定的國值时所经历的循环数(eyele threshold)RNA:核糖核酸(ribonucleic acid)Tag酶：Taq DNA聚合酶(Taq DNA polymerase)TE缓冲液：Tris-EDTA缓冲液(Tris-EDTA buffer)DEPC:焦碳酸二乙酯(diethylpyrocarbonate)PRRSV:猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus)PBS:磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution)4仪器4.1荧光PCR检测仪。4.2高速台式冷冻离心机：可控温至4、离心速度可达12000r/min以上。4.3组织研磨器或者研钵。4.4普通冰箱：28。4.5超低温冰箱：可控温至一70以下。4.6微量移液器：0.2L2L、1L10L、10L100L、20L200L、100L1000L,并配备与移液器匹配的吸头。4.7高压灭菌锅。