痒病诊断技术 GBT 22910-2008.pdf

GB/T22910-2008依次按以下程序染色：a)苏木素染液15min;b)自来水漂洗2min:c)1%盐酸酒精10s;d)自来水漂洗5min;e)饱和碳酸锂水溶液30s:D自来水漂洗10min:g)75%酒精2min:h)85%酒精2min:i)95%酒精伊红液1min。3.1.5脱水、透明依次处理的程序如下：a)95%酒精2min:b)100%酒精I2min:c)100%酒精2min;d)二甲苯I2min:e)二甲苯2min.3.1.6封片以适量中性树胶封片，置38C温箱干燥或自然干燥。3.1.7贴签用适当大小的不干胶签贴在载玻片的磨砂端，然后用铅笔或记号笔将切片的编号、名称、实验时间等记录在不干胶签上。3.1.8镜检及判定3.1.8.1镜检观察在光学显微镜下观察切片，倍数分别为1010、1020和1040，3.1.8.2阳性结果灰质区神经细胞或神经纤维网浆中出现空泡变性。神经细胞内呈规则的圆形或卵圆形，空泡内不着色或被伊红淡染，界限明显，胞核被挤压于一侧，甚至消失：有的神经细胞被单个或多个特异性空泡胀大，成为“气球样”空泡性神经细胞。特别容易出现病变的部位有延髓的迷走神经背核、舌下神经核、橄榄核、网状结构，桥脑的桥核、网状结构，中脑的红核、被盖核和丘脑内诸核等处。这些部位的神经细胞出现特异的大空泡以及丘脑、大脑纹状体空泡病变，且呈双侧对称性分布。在正常情况下，动眼神经核和红核处也可能有少量空泡出现，但不呈双侧对称，应注意区别。3.1.8.3阴性结果灰质区无特征性空泡变性。3.1.8.4确诊组织病理学检查只是痒病确诊的铺助方法，进行确诊时还应结合免疫组织化学方法或其他免疫学方法来进一步诊断。3.2免疫组织化学法检查3.2.1试剂配制见附录C。3.2.2采样3.2.2.1脑组织采样同3.1.1。3.2.2.2活体采集第三眼脸淋巴组织的方法如下：在被检羊眼角滴加2%盐酸利多卡因局部麻醉后，3