饲料添加剂 维生素A乙酸酯微粒 GBT 7292-1999.pdf

GB/T7292-19994试验方法本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GBT6682规定的三级水。4.1外观和粒度称取样品50g,用肉眼观察颜色，再用孔径为0.84mm的分样筛测定。4.2鉴别4.2.1试剂和溶液4.2.1.1无水乙醇4.2.1.2三氯化锑-三氯甲烷溶液：取三氯化锑1g,加三氯甲烷使之成4mL。4.2.2方法称取试样0.1g,用无水乙醇(4.2.1.1)湿润后，研磨数分钟，加三氯甲烷10mL,振摇过滤，取滤液2mL,加三氯化锑-三氯甲烷溶液(4.2.1.2)0.5mL,即呈蓝色，并迅即褪去蓝色。4.3维生素A乙酸酯含量测定维生素A的含量以每克样品中所含维生素A的国际单位表示。测定过程均应在半暗室中尽快进行。4.3.1试剂和溶液4.3.1.1无水乙醇。4.3.1.2全反式维生素A乙酸酯对照品。4.3.1.3碱性蛋白酶（酶活力每克大于40000单位）。4.3.1.40.1%氨水溶液。4.3.1.5乙腈：色谱纯。4.3.1.6异丙醇：色谱纯。4.3.1.7重蒸馏水（经处理液相色谱专用）。4.3.2仪器设备4.3.2.1超声波恒温水浴。4.3.2.2高速离心机。4.3.2.3高压液相色谱仪。4.3.3测定方法4.3.3.1对照品溶液的制各精确称取约8590mg(准确至0.0001g)全反式维生素A乙酸酯对照品(4.3.1.2)，置于50mL棕色容量瓶中，加入3040mL,无水乙醇(4.3.1.1)，置于超声水浴中处理2min使之完全溶解，用无水乙醇稀释到刻度，摇匀。精密吸取此溶液10.00mL于100L棕色容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀待测。4.3.3.2试样溶液的制备精确称取试样约0.2g(准确至0.0001g),置于200mL棕色容量瓶中，加入200mg的碱性蛋白酶(4.3.1.3),0.1%氨水溶液(4.3.1.4)10mL,将容量瓶置于45C超声波水浴中处理10min,加人100mL无水乙醇后猛烈振摇，然后用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。将混合液离心后，取上清液经0.2微孔滤膜过滤后用于高效液相色谱的测定。4,3.3.3高效液相色谱条件色谱柱：不锈钢色谱柱，长250mm,内径4.6mm.固定相：0DS-2,5m。流动相：乙腈：异丙醇：水=1500：250：250。流速：1.0ml/min。