饲料中维生素D3的测定 高效液相色谱法 GBT 17818-1999.pdf

中华人民共和国国家标准饲料中维生素D3的测定高效液相色谱法GB/T17818-1999Determination of vitamin D3 in feeds-High-pressure liquid chromatography1范围本标准规定了饲料中维生素D,的测定一高效液相色谱法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料和维生素预混料中维生素D,的测定测量范围为每千克样品中含维生素D,(胆钙化醇)的量在500IU以上。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T6682一1992分析实验室用水规格和试验方法3方法原理用碱溶液皂化试验样品，乙醚提取未皂化的化合物，蒸发乙醚，残渣溶解于甲醇并将部分溶液注人高效液相色谱净化柱中除去干扰物，收集含维生素D,淋洗液馏分，蒸发至干，溶解于正己烷中，注入高效液相色谱分析柱，用紫外检测器在264m处测定，通过外标法计算维生素D,的含量。当样品中维生素D,标示量超过每千克10000U时，可省去高效液相色谱净化柱，试验溶液直接注入色谱分析柱分析。4试剂和材料除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T6682用水的规定。4.1无水乙醚：无过氧化物。4,1.1过氧化物检查方法：用5mL乙醚加1mL,10%碘化钾溶液，振摇1mi,如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色。若加0.5%淀粉指示液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。4,1.2去除过氧化物的方法：乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用蒸馏水振摇洗涤两次，重蒸，弃去首尾5%部分，收集馏出的乙醚，再检查过氧化物，应符合规定。4.2乙醇。4.3正己烷：重蒸馏（或光谱纯）。4.41,4-二氧六环。4.5甲醇：优级纯。国家质量技术监督局1999-08-10批准2000-02-01实施1