食品接触材料 高分子材料 食品模拟物中丙烯酰胺的测定 高效液相色谱法 GBT 23296.9-2009.pdf

GB/T23296.9-20094.13丙烯酰胺标准中间溶液：分别取丙烯酰胺标准使用液(4.12)0mL、0.5mL,、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL至6只10mL的容量瓶中，以甲醇定容。此标准溶液中的丙烯酰胶含量为0g/mL、0.5ug/mL、1.0ug/mL、2.0g/mL、3.0g/mL、4.0ug/mL。5仪器与设备5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器和25L定量环。5.2分析天平：感量0.1mg、0.01g。5.3样品瓶：容量120L,配备铝盖和丁基橡胶隔垫或硅树脂橡胶隔垫，隔垫接触样品一面应涂有聚四氟乙烯。5.4注射器：5mL,5.5微孔滤膜：0.2m。6试液的制备6.1食品模拟物试液的制备6.1.1总则食品模拟物试液按照GB/T23296.1一2009的要求从迁移试验中获取，于4冰箱中避光保存，6.1.2水基食品模拟物试液的制备从迁移试验中移取1mL水基食品模拟物，通过0.2m微孔滤膜(5.5)过滤后供高效液相色谱进样。平行制样两份。6.1.3橄榄油试液的制备从迁移试验中称取50.0g士0.5g橄榄油至120mL的玻璃样品瓶(5.3)，加25.0mL士0.5mL水，剧烈振荡1min。静置20min分层，用注射器(5.4)吸取约4mL下层水溶液，通过0.2m微孔滤膜(5,5)过滤后供高效液相色普进样。平行制样两份。6.2空白溶液的制备按照6,1的操作处理未与食品接触材料接触的食品摸拟物。6.3标准工作溶液的制备6.3.1水基食品模拟物介质标准工作溶液分别准确移取1.0mL丙烯酰胶胺标准中间溶液(4.13)加入6只50mL容量瓶中，用水定容，得到浓度分别为0g/mL、0.01g/mL、0.02g/mL、0.04g/mL、0.06g/mL、0.08g/mL的标准工作溶液。采用同样方式，分别用3%乙酸溶液(4,9)和10%乙醇溶液(4.10)配制同样系列的丙烯酰胶标准工作溶液。6.3.2橄榄油介质食品模拟物标准工作溶液分别称取50.0g0.5g橄榄油至6只120mL的样品瓶(5.3)，并准确添加1.0mL的丙烯酰胶标准中间溶液(4.13)，混匀，再加25.0mL士0.5mL的水，剧烈振荡1min。静置约20mn分层，用注射器吸取约4mL下层水溶液，通过0.2m微孔滤膜(5.5)过滤。标准工作溶液的浓度分别为0g/g、0.01ug/g、0.02ug/g、0.04g/g、0.064g/g、0.08g/g。7测定7.1色谱条件a)色谱柱：IonPac ICE-AS1,离子排斥色谱柱（柱填充物为键合磺酸基团的苯乙烯-二乙烯基苯聚合物)，250mm4.0mm(内径)，粒径5m,或相当者，b)流动相：量取70mL硫酸溶液(4.8)于1L容量瓶中，并用500mL水稀释，然后加入70mL乙腈(4.5)，用水定容：GB/T23296.9-2009c)流速：0.16ml/min:d)柱温：室温：c)紫外检测器：波长202nm。7.2标准曲线的绘制按照7.1所列测定条件，对6.3.1和6.3.2中制备的标准工作溶液依次进样测量。以标准工作溶液中内烯酰按浓度为横坐标，单位以“mg/1或g/kg”表示，以对应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标准色谱图参见附录A。按式(1)计算回归参数：y=aXx十b(1)式中：y一丙烯酰胺的峰面积值；a一回归曲线的斜苹：一标准工作溶液中丙烯酰胺的浓度，单位为毫克每升或毫克每千克(mg/L或mg/kg):b一回归曲线的截距。标准曲线的相关系数应不小于0.996。7.3试液测定对空白溶液(6.2)和食品模拟物试液(6.1)依次进样，扣除空白值，获得丙烯酰胺的峰面积值。8结果计算8.1食品模拟物试液中丙烯酰胺的浓度计算食品摸拟物试液中丙烯酰胺的浓度c按式(2)计算：c=y-b4 448448444446480naa4n(2）式中：c一食品摸拟物试液中丙烯酰胺的浓度，单位为毫克每升或毫克每千克(mg/L或mg/kg)；y一丙烯酰胺峰面积：一回归曲线的截距；一回归曲线的斜率。8.2丙烯酰胺特定迁移量的转换计算由8.1得到的食品模拟物试液中丙烯酰胺浓度，根据迁移试验中所使用的食品模拟物的体积和测试样品与食品模拟物接触面积，通过数学换算计算出丙烯酰胺的特定迁移量，单位以“mg/dm2或mg/kg”表示。详见GB/T23296.1一2009的第13章。计算结果以平行测定值的算术平均值表示，保留2位有效数字。9重复性在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过10%。