食品中诱惑红的测定 GBT 5009.141-2003.pdf

GB/T5009.141-20035分析步骤5.1试样的处理5.1.1汽水：将试样加热去二氧化碳后，称取10.0g试样于烧杯中，然后用20%柠檬酸调pH呈酸性，加入0.5g1.0g聚酰胺粉吸附色素，将吸附色素的聚酰胺粉全部转到漏斗中过滤，用pH4的酸性热水洗涤多次（约200mL),以洗去糖等物质。若有天然色素，用甲醇-甲酸溶液洗涤1次一3次，每次20L,至洗液无色为止。再用70C的水多次洗涤至流出液中性。洗涤过程必需充分搅并然后用乙醇氨水溶分次解吸色系，收集全部解吸液，于水浴上驱除氨，蒸发至2mL左右，转入5L的容量瓶中，用50%的乙醇分次洗涤蒸发皿，洗涤液并入5L的容量瓶中，用50%的乙醇定容至刻度。此液留作纸色谱用。5.1.2硬糖：称取10.0g的已粉碎的试样，加30mL的水，温热溶解，若试样溶液的pH值较高，用柠檬酸溶液(3.10)调至pH4左右。以下按“5.1.1汽水”中“加人0.5g1.0g加聚酰氨粉吸附”起操作。5.1.3糕点：称取10.0g已粉碎的试样，加人30L石油醚提取脂肪，共提三次，然后用电吹风吹干，倒入漏斗中，用乙醇-氨解吸色素，解吸液于水浴上蒸发至20mL,加入1mL的钨酸钠溶液沉淀蛋白，真空抽滤，用乙醇-氨解吸滤纸上的诱惑红，然后将滤液于水浴上挥去氨，调pH呈酸性，以下按“5.1.1汽水”中“加入0.5g一1.0g聚酰胺粉吸附色素”起操作。5.1.4冰淇淋：称取10.0g已均匀的试样于烧杯中，加入20g海沙15mL石油醚提去脂肪，提取2次，倾去石油醚，然后在50C的水浴上挥去石油醚，再加人乙醇-氨解吸液解吸诱惑红，解吸液倒入100mL的蒸发皿中，直至解吸液无色。将解吸液于水浴上挥去乙醇，使体积约为20mL时，加人1mL硫酸(1十10)，1mL钨酸钠溶液沉淀蛋白，放置2mi,然后用乙醇-氨调至pH呈碱性，将溶液转人离心管中，5000r/min,离心15min,倾出上清液，于水浴上挥去乙醇，然后用柠檬酸溶液(3.10)调pH呈酸性，以下按“5.1.1汽水”中“加入0.5g1.0g聚酰胺粉吸附”起操作。5.2定性取色谱用纸，在距底边2m起始线上分别点3L10L的试样处理液、1mL色素标准液，分别挂于盛有3.14.1、3.14.2、3.14.3展开剂的展开槽中，用上行法展开，待溶剂前沿展至15cm处，将滤纸取出空气中晾干，与标准斑比较定性。5.3定量5.3.1标准曲线的制备吸取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL诱惑红标准使用液，分别置于10mL比色管中，各加水稀释到刻度。用1mL比色杯，以零管调零点，于波长500m处，测定吸光度，绘制标准曲线。5.3.2试样的测定取色谱用纸，在距离底边2m的起始线上，点0.20L,试样处理液，从左到右点成条状。纸的右边点诱惑红的标准溶液1L,依法展开，取出晾干。将试样的色带剪下，用少量热水洗涤数次，洗液移入10mL的比色管中，加水稀释至刻度，混匀后，与标准管同时在500nm处，测定吸光度。6结果计算试样中诱惑红的含量按下式计算：X=A10001000mX可、式中：X一试样中的诱惑红的含量，单位为克每千克(g/kg):