生化制品中还原糖的测定 柱前衍生高效液相色谱法 GBT 40980-2021.pdf

GB/T40980-20215.10三乙胺(C6H1sN)。5.11正己烷(CH)。5.12亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取106.0g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至1000mL。5.13乙酸锌溶液(220g/1):称取220.0g乙酸锌，用水稀释至1000mL。5.140.5mo1/11-苯基-3-甲基-5-吡唑啉围(PMP)衍生溶液：称取87.1gPMP行生化试剂，加甲醇溶解并定容至1000mL。5.151.0mol/L NaOH溶液：称取40.0g氢氧化钠，加入水中溶解并稀释至1000mL。5.161.0mol/LHC1溶液：取83.2mL浓盐酸，缓慢加入约800mL水中，冷却后加水定容至1000mL.5.17糖标准品：D-甘露糖(CAS:3458-28-4)、D核糖(CAS:50-69-1)、I-鼠李糖(CAS:10030-85-0)、D半乳糖(CAS:59-23-4)、L-阿拉伯醛糖(CAS:5328-37-0)、D-木糖(CAS:31178-70-8)、L-岩藻糖(CAS:2438-80-4)、D-葡萄糖(CAS:50-99-7)、D-麦芽糖(CAS:3458-284)、D-乳糖(CAS:63-42-3),纯度均99%。5.18混合标准储备液：分别称取100mg标准物质（精确至0.1mg),用水溶解并定容至100mL,配制成质量浓度约为1000g/mL的混合标准储备液，冷藏保存，5.19标准工作溶液的配制：分别取0.05mL、0.10mL、0.20mL、0.5mL、1mL、2mL混合标淮储备液定容至10mL容量瓶，配制成5g/mL、10g/mL、20g/mL、50g/mL、100g/mL和200g/mL标准溶液浓度系列。5.20微孔过滤膜：孔径0.45m,6仪器设备6.1高效液相色谱仪：配紫外检测器(UV)或二极管阵列检测器(DAD)。6.2分析天平：感量0.01mg和0.0001g。6.3超声被提取器：功率250W,工作频率40kHz。6.4离心机：最大转速15000r/min。6.5酸度计：精度为0.01个pH单位，pH值测定范围为014。6.6数显恒温水浴锅：精确度到0.1。6.7涡旋混匀器。6.8电动粉碎机。7分析步骤7.1样品制备取有代表性的样品至少50g,固体样品（液体样品混匀直接待用）用电动粉碎机粉碎（过孔径为0.3mm的筛)，混匀后装入洁净的盛样容器内，作为试样，室温密封储存。7.2样品前处理7.2.1固体样品前处理称取样品5g(精确到0.001g)于50mL高心管中，加入20mL水，在沸水浴中提取30min,超声提取10min:样液没却后，加入正己烷5mL,涡旋2min,于5000r/min离心5min,弃去正己烷层，将水层清液倒人50m容量瓶中：向周体残渣中加入10m1水，涡旋2min,于5000r/min离心3min,水2