实验动物 猴逆转D型病毒检测方法 GBT 14926.61-2001.pdf

1CS65.020.30B44B中华人民共和国国家标准GB/T14926.61一2001实验动物猴逆转D型病毒检测方法Laboratory animal-Method for examination ofsimian retrovirus D(SRV)2001-08-29发布2002-05-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布中华人民共和国国家标准实验动物GB/T14926.61-2001猴逆转D型病毒检测方法Laboratory animal-Method for examination ofsimian retrovirus D(SRV)1范围本标准规定了猴逆转D型病毒(SRV)的检测方法、试剂等。本标准适用于猴SRV的检测。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T14926.50一2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.52一2001实验动物免疫荧光试验3原理根据免疫学原理，采用SRV抗原检测猴血清中SRV抗体。4主要试剂和器材41试剂4.1.1 ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原：用SRV感染Raji细胞，接种1014天，细胞融合明显时，收获培养液。冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。4.1.1.2正常抗原：Rji细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液。4.1.2抗原片SRV感染Raji细胞，接种后1014d,病变达十十十十十时，800r/min离心510min,PBS洗涤，涂片。室温干燥的同时，在紫外线下20cm处照射30min,冷丙酮固定10min。一20C保存。4.1.3阳性血清SRV抗原免疫或自然感染的猴血清。4.1.4阴性血清无SRV感染的猴血清。4.1.5酶结合物辣根过氧化物酶标记羊或兔抗猴1gG抗体。4.1.6异疏氰酸荧光素标记羊或兔抗猴1gG抗体。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准2002-05-01实施