天然胶乳医用手套水抽提蛋白质的测定 改进Lowry法 GBT 21870-2008.pdf

GB/T21870-2008/1S012243:20035.1无蛋白质手套由合成胶乳或塑料制造、无粉且不含其他可转移到试样或抽提液中的物质的手套。5.2离心机性能至少达到60000m/s2(6000g)。注：当离心时间延长时，温度可能会上升，最好用冷冻离心机。5.3离心管容量为200mL、50mL、10mL、2mL、1.5mL蛋白质吸附量少的聚丙烯或聚乙娇（如果适用）离心管。5.4锥形瓶容量为250mL。5.5微量移液器。5.6试管振动器振动频将为3Hz6Hz。5.7漩涡混合器或超声波仪。5.8一次性使用滤膜蛋白质吸附量少且孔径为0.45m或更小的滤膜。5.9夹持器在抽提过程中用来夹持手套并保持不漏水的设备，夹持器可为一对与泡沫橡胶连接的能用螺钉疗在一起的铝条，或者为血液透析用170m长的塑料夹具。5.10分光光度设备5.10.1分光光度计带有一次性使用的聚苯乙烯透明比色皿（可用石英材质但要求十分干净），5.10.2酶标仪96孔容量为0.25mL0.5mL的聚苯乙烯平底酶标仪.注：最好使用容量0.5mL的孔板，也可用较小容量的孔板，但会降低分析灵做度，5.11天平精确到0.0001g。6试剂试验过程中，使用试剂均为分析纯和蒸榴水或去离子水。6.1染色剂：溴苯酚蓝（钠盐），将0.1g溴苯酚蓝溶于1L水中，有效期为4周。6.2抽提液：在整个抽提过程中pH值能保持在7.4士0.4范围内的一种缓冲溶液。注1：适用的缓冲落液包括0.01mo/L的磷酸盐缓冲溶液(PBS)和0.1mol/L的-（羟甲基）-甲基-2-氨基乙磺酸钠盐级冲溶液(TES)。磺酸盐缓冲溶液的制备是根据产品说明将磷酸盐溶解于蒸馏水中，如果缓冲溶液的pH值达不到7.4士0.4，有必要使用浓度高一点的磷酸盐溶液。TES级冲溶液的制备是将24gTES溶于500mL的水中，然后用水稀释至1L,注2：PBS和TES容易从市场获得，6.3改进的Lowry蛋白质分析试剂6.3.1试剂A:威性柠檬酸铜溶液，将10份试剂C和0.2份试剂D混匀，在检验的当天配制。也可使用碱性酒石酸铜，同样应在检验的当天配制。成套试剂中则会含有可能影响检测的未加说明的保护剂。6.3.2试剂B:用28mL水加入72mL2mo/L的福林试剂后得到的稀溶液。注：2mol/L的福林试剂可从市场上购买，例如：可从美国西格玛化学公司(Box14508,St Louis,MO63178)获得(目求号F9252),有些工业用高浓度的福林试剂可能达不到2mo/L。