李痘病毒检疫鉴定方法 GBT 31800-2015.pdf

GB/T31800-20154.4实时荧光RT-PCR检测方法实时荧光RT-PCR检测方法具体操作步骤见附录D。4.5免疫电子显微镜观察按SN/T1840执行。4.6株系鉴定在检出李痘病毒时，必要时可对其进行株系鉴定，株系鉴定的具休操作步骤见附录E。5结果判定采用DAS-ELISA进行初筛，测定结果为阴性，判定未检出李应病毒：测定结果为阳性，用普通RT-PCR方法或实时荧光RT-PCR方法进行验证，当验证结果也为阳性时，则判定检出李痘病毒。若需进一步鉴定该病毒，可采用免疫电子显微镜观察或PCR产物序列测定等进行复验。6样品保存与结果记录6.1样品保存经检验确定携带李痘病毒的样品，经登记和标记后保存在一20冰箱中，有条件的保存在一80冰箱中，妥善保存6个月，以备复核。6.2结果记录需要保存的记录包括：样品的种类、自然状态、来源、为害症状及为害程度（无症状也要说明），诊断时使用的方法（包括质控物质，以及每种方法获得的结果），酶联免疫吸附测定法检测应有酶联板反应的数值，RT-PCR检测应有电冰结果照片，实时荧光RT-PCR应有扩增曲线图片，鉴定实验室的名称，负责人和鉴定人的签字等，2