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高良姜素通过激活Nrf2信...氧_复氧诱导的心肌细胞损伤_杨芳.pdfVIP免费

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基金项目:陕西省重点研发计划项目(2021SF-396);陕西省中医药科研项目(2021-ZZ-JC042);陕西省中医药管理局市级中医医院科研能力提升项目(SZY-NLTL-2022-011);咸阳市重点研发计划项目(L2022ZDYFSF076)作者简介:杨芳,女,1986-08生,硕士,主管药师,E-mail:yangf87@126.com收稿日期:2023-01-13高良姜素通过激活Nrf2信号通路减轻低氧/复氧诱导的心肌细胞损伤杨芳1,刘宝贵1,庞洋1,贾帅芸1,廉秋芳2*(1延安大学咸阳医院药学部,咸阳712000;2延安大学咸阳医院心内科;*通讯作者,E-mail:wjylqf@163.com)摘要:目的观察高良姜素(galangin,Gal)对低氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响,并探讨可能的作用机制。方法采用小鼠HL-1心肌细胞构建H/R细胞模型。实验分为常氧对照组、H/R组(先低氧6h,后常氧12h)、H/R+溶剂组、H/R+10μmol/LGal组、H/R+30μmol/LGal组和H/R+50μmol/LGal组。H/R+溶剂组、H/R+10μmol/LGal组、H/R+30μmol/LGal组和H/R+50μmol/LGal组分别采用溶剂对照二甲基亚砜、10μmol/LGal、30μmol/LGal、50μmol/LGal预处理心肌细胞1h,然后进行H/R处理。采用细胞计数试剂盒-8(cellcountingkit-8,CCK-8)检测细胞活性。采用乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)试剂盒检测细胞损伤。采用TUNEL实验检测细胞凋亡。采用活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)试剂盒检测ROS水平。采用丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒检测MDA含量。采用超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)试剂盒检测SOD活性。采用荧光素酶报告基因实验检测核转录因子E2相关因子2(nuclearfactor-erythroid2-relatedfactor2,Nrf2)的转录活性。采用Westernblot检测Nrf2、醌氧化还原酶1(quinoneoxidoreductase1,NQO-1)和血红素加氧酶1(hemeoxygenase1,HO-1)的蛋白表达水平。通过GraphPadPrism8软件计算高良姜素的半最大效应浓度(halfmaximaleffectiveconcentration,EC50)和半最大抑制浓度(halfmaximalinhibitoryconcentration,IC50)。采用Nrf2抑制剂ML385验证高良姜素是否通过Nrf2抑制H/R心肌细胞损伤。结果与常氧对照组比较,H/R组和H/R+溶剂组中心肌细胞活性降低,而心肌细胞损伤、凋亡、ROS水平和MDA含量升高,并且SOD活性降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。与H/R组和H/R+溶剂组比较,不同剂量的高良姜素处理组心肌细胞活性均升高(P<0.05),而心肌细胞损伤、凋亡和氧化应激均下降,并呈剂量依赖...

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