结核分枝杆菌耐药基因芯片检测基本要求 GBT 36136-2018.pdf

1CS11.040.55C30中华人民共和国国家标准GB/T36136一2018结核分枝杆菌耐药基因芯片检测基本要求General requirements of DNA array-based M.tuberculosisdrug resistance detection2018-05-14发布2018-12-01实施国家市场监督管理总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T36136-2018结核分枝杆菌耐药基因芯片检测基本要求1范围本标准规定了结核分枝杆菌耐药基因芯片检测基本要求。本标准适用于源自临床样品的结核分枝杆菌对常用一、二线抗结核药物的耐药性相关基因的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。YY/T1153休外诊断用DNA微阵列芯片YY/T1154激光共聚焦扫描仪医疗机构临床基因扩增管理办法（卫办医政发2010194号）3缩略语下列缩略语适用于本文件。DNA:脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid)PCR:聚合链反应(Polymerase Chain Reaction)4原理根据临床常见的结核分枝杆菌耐药基因的特异性保守核酸序列，设计特异性的PCR扩增引物及相应的寡核苷酸探针。以临床样品中分离的结核分枝杆菌DNA为模板，加入带有末端发光标记物的引物，运用PCR技术扩增其耐药基因目标片段，打扩增后的待测DNA即带有发光标记物。将标记有发光标记物的PCR扩增产物与芯片上的探针在一定的条件下进行杂交反应，根据碱基互补配对原则，序列匹配的PCR扩增产物与探针形成稳定的二级结构。根据探针在芯片上的特定排布位置，就可以检测出相应被测DNA的相关信息，推斯出样品的耐药基因信息。5仪器材料与试剂5.1仪器与材料应符合YY/T1154要求并获得医疗器械注册证书的微阵列芯片扫描仪、微阵列芯片杂交盒、核酸扩增仪、芯片杂交仪（备选）、芯片洗干仪（备选）、冰箱（一20）、微量加样器及加样器吸头、恒温水浴锅、微量离心机、离心管、恒温摇床，芯片洗涤容器及玻片架。