牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法 GBT 27981-2011.pdf

GB/T27981-2011前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准参考了OE发布的陆生动物诊断试脸和疫苗手册？(2008版)关于牛传染性鼻气管炎/牛传染性化脓性外阴阴道炎(Chapter2.4.13)的内容。本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检脸检疫局、中华人民共和国江苏出人境检险检疫局。本标准主要起草人：陈茹、刘中勇、林志雄、罗琼、曾碧健、许如苏、姜焱、吴晓微。IGB/T27981-2011牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法1范围本标准规定了牛传染性鼻气管炎病毒（牛疱疹病毒I型，BoHV-1)实时荧光PCR检测方法的技术要求。本标准适用于快速检测牛血样、拭子、精液、动物组织（粘膜、肝、脾、肾、淋巴结、胎盘组织等）和细胞培养物等样品中BoHV-1病毒感染。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试脸方法世界动物卫生组织(OE)陆生动物诊断试验和疫苗标准手册(2008版)关于检测牛冷冻精液中BoHV-1病毒的实时荧光PCR方法3缩略语下列缩咯语适用于本文件。BoHV-l:bovine herpesvirus type1,牛疱疹病毒I型。C:值：荧光信号量达到设定的國值时所经历的循环数。DNA:deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸，DTT:DL-dithiothreitol,二硫苏糖醇。EDTA:ethylene diaminetetraacetic acid,乙二w四乙酸。IBR:bovine infectious rhinotracheitis,.牛传染性鼻气管炎。PBS:phosphate buffer solution,磷酸盐缓冲生理盐水，PCR:polymerase chain reaction,聚合酶链式反应。SDS:sodium dodeeyl sulfate,十二烷基磺酸钠。UDG酶：uracil DNA glycosylase,.尿嘧啶DNA糖基化酶。4设备和器材4.1荧光PCR仪。4.2台式冷冻离心机。4.3可凋微量移液器：规格10L、100L、200L、1mL。4.4带滤芯微量吸头：规格10L、100L、200L、1mL。4.5PCR光学反应管。4.6微量离心管。4.7涡旋混匀器。4.8恒温培养箱。4.9冰箱：规格2一8，一20，一80，1