转基因植物产品数字PCR检测方法 GBT 33526-2017.pdf

GB/T33526-2017转基因植物产品数字PCR检测方法1范围本标准规定了转基因成分检划的数字PCR方法。本标准适用于玉米、大豆、油菜、水稻、马铃薯、首蓿、棉花等转基因植物及其产品的转基因成分数字PCR检测。本标准所能达到的检测低限为01%（质量分数）。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T19495.1转基因产品检测通用要求和定义GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件，3.118 srRNA基因18 srRNA gene转录自18 srDNA,是细胞核糖体的组分之一。3.2CaMV35s启动子基因CaMV35 s promotor来自花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)的35s启动子。3.3NOS终止子基因NOS terminitor来自胭脂减合成酶基因NOS的终止子。4原理数字PCR其技术原理是通过将原始PCR反应体系进行分制，进而对所有小的反应体系进行扩增并后续检测。通过对反应体系进行有限的分割，从而使整个反应体系可以更加耐受核俊抑制因子，并且更加稳定、准确、快速地对痕量的转基因成分进行精准鉴定。现阶段数字PCR的实现形式包括芯片式数字PCR与微滴式数字PCR两种。其中芯片式数字PCR通过微流控芯片实现对原始反应体系的分割，这种分割方式具有稳定性好，均一性好的优点，但是这种分割方式的实验成本相对较高；微滴式数字PCR平台通过产生微小油包水体系实现反应体系的分