转基因产品检测 实时荧光定性聚合酶链式反应(PCR)检测方法 GBT 19495.4-2018.pdf

GB/T19495.4-2018转基因产品检测实时荧光定性聚合酶链式反应(PCR)检测方法1范围GB/T19495的本部分规定了植物及其加工产品中转基因成分筛选和品系检测实时荧光定性聚合酶链式反应(PCR)检测方法有关的仪器设备、试剂和材料、检测步骤、质量控制、防污染措施以及方法的最低检出限。本部分适用于大豆，玉米、油菜、水稻、棉花、马铃薯、亚麻、甜菜、首蓿、番茄、木瓜、苹果、菊苣、剪股颗，烟草、李子、甜瓜、小麦、茄子和桉树等植物转基因筛选检测，也适用于大豆、玉米、油菜、棉花、水稻、马铃薯、亚麻、甜菜和木瓜等植物的品系特异性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测3术语、定义和缩略语3.1术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1.1转基因transgene将物种本身具有的或来源于其他物种的功能DNA序列，通过生物工程技术，使其在该物种中进行转录或表达，以便使该物种获得新的品种特征的技术。3.1.2实时荧光PCR real-time polymerase chain reaction实时荧光聚合酶链式反应。在聚合酶链式反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，并通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。注：荧光信号的强弱直接反映模板数量。3.1.3内源基因endogenous gene在检测物种中拷贝数恒定的、不显示等位基因变化的基因。注：该基因可用于判定物种特异性。1