添加剂预混合饲料中维生素B6的测定 高效液相色谱法 GBT 14702-2018.pdf

GB/T14702-2018添加剂预混合饲料中维生素B,的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了添加剂预混合饲料中维生素B,(盐酸吡哆醇)测定的高效液相色谱法。本标准适用于维生素预混合饲料和复合预混合饲料中维生素B。的测定，紫外检测器色谱条件下的定量限为30mg/kg:荧光检测器色谱条件下的定量限为10mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样中维生素B。经酸性提取液超声提取后，注人高效液相色谱仪反相色谱系统中进行分离，用紫外检测器（二极管矩阵检测器）或者荧光检测器检测，外标法计算维生素B的含量。4试剂或溶液除特殊说明外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T6682中一级用水规定。4.1二水合乙二胺四乙酸二纳(EDTA):优级纯。4.2庚烷磺酸钠(PICB,):优级纯。4.3冰乙酸：优级纯。4.4三乙胶：优级纯。4.5甲醇：色谱纯。4.6盐酸溶液：取8.5mL盐酸，用水定容至1000mL。4.7磷酸二氢钠溶液：3.9g磷酸二氢钠溶于1000mL超纯水中，过0.45m水系滤膜。4.8提取剂：在1000mL容量瓶中，称50mg(精确至0.001g)EDTA(4.1)、依次加人700mL去离子水，超声使EDTA完全溶解。加入25mL冰乙酸(4.3)、5mL三乙胺(4.4)，用去高子水定容至刻度，摇匀。取该溶液800mL与200mL甲醇混合，超声脱气，待用。4.9流动相：在1000mL容量瓶中，称50mg(精确至0.001g)EDTA(4.1)、1,1g(精确至0.001g)庚烷磺酸钠(4.2)，依次加入700mL去离子水，25mL冰乙酸(4.3)、5mL三乙胺(4.4)，用去离子水定容至刻度，摇匀。用冰乙酸、三乙胶调节该溶液pH至3.700.10，过0.45m滤膜。取该溶液800mL与200mL甲醇(4.5)混合，超声脱气，备用。