食品卫生微生物学检验 鲜乳中抗生素残留检验 GBT 4789.27-2008.pdf

GB/T4789.27-2008前言本标准修改采用了国际分析家学会(AOAC)AOAC982.18X液体牛奶制品中的3-乳胺抗生素定性的颜色反应试验(AOAC Official Method982.l8:Beta-lactam antibiotics in fluid milk produets-一Qualitative color reaction tests)作为第二法。本标准与AOAC982.18相比主要区别如下：一扩大适用范围为鲜乳中能抑制嗜热脂肪芽胞杆菌卡利德变种(Bacillus stearothermophilusvar,calidolactis)的抗生素的检验，也可用于复原乳、消毒灭荫乳、乳粉中抗生素的检测：一修改了试剂盒加营养片方法，直接将含有试验菌株芽胞的培养基制备在小试管内：一将“注：偶尔有特殊批次的试剂盒可能需要较长的温育时间才能完全显色。如果每隔10min检查一次颜色显示情况，并记录每个批号产品所需要的最适当的温育时间。(Note:Occasionally kits of a particular Lot No.may require a longer incubation time for color tofully develop.If.Check color development at 10 min intervals and record optimum incu-bation1 ime required for each Lot No.)”程序修改为“如果颜色没有变化，须再于水浴中培养30min作最终观察”，一明除青霉素酶确证程序。本标准代替GB/T4789.27一2003食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留量检险。本标准与GB/T4789.27一2003相比主要修改如下：一标准名称修改为“食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留检验”；一增加了第二法，将原标准的嗜热乳酸链球菌方法确定为第一法：一增加了附录A“培养基和试剂”。本标准的附录A为规范性附录。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。本标准负责起草单位：福建省疾病预防控制中心。本标准参加起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、中国检验检疫科学研究院、河南省疾病预防控制中心、湖北省疾病预防控制中心。本标准主要起草人：马群飞、郭云昌、李瑾、田卫、廖兴广、马弋、田静。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB4789.27-1984、GB/T4789.27-1994、GB/T4789.27-2003。GB/T4789.27-2008食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留检验1范围本标准规定了鲜乳中抗生素残留的检验方法。本标准的第一法适用于鲜乳中能抑制嗜热链球菌(Srep1 ococcus thermophilus)的抗生素的检验：第二法适用于鲜乳中能抑制嗜热脂肪芽胞杆菌卡利德变种(Bacillus stearothermophilus var.calidola-cs)的抗生素的检验，也可用于复原乳、消毒灭菌乳、乳粉中抗生素的检测。第一法嗜热链球菌抑制法2原理样品经过80C杀菌后，添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后，嗜热徒球菌开始增殖。这时候加入代谢底物2,3,5-氣化三苯四氨唑(TTC),若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限，嗜热链球菌将继续增殖，还原TTC成为红色物质。相反，如果样品中含有高于检则限的抑菌剂，则赠热链球菌受到抑制，因此指示剂TTC不还原，保持原色。3设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1冰箱：2C5C、-20-5C。3.2恒温培养箱：36土1C。3.3带盖恒温水浴锅：36C土1C、80C士2C。3.4天平：感量0.1g、0.001g。3.5无菌吸管：1mL(具0.01mL刻度)，10.0mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。3.6无菌试管：18mm180mm。3.7温度计：0100。3.8旋涡混匀器。4菌种、培养基和试剂4.1菌种：嗜热徒球菌。4.2灭菌脱脂乳：见第A.1章。4.34%2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液：见第A2章，4.4青霉素G参照溶液：见第A.3章。5检验程序鲜乳中抗生素残留检验程序见图1。1