食品中葡萄糖的测定 酶-比色法和酶-电极法 GBT 16285-2008.pdf

GB/T16285-2008食品中葡萄糖的测定酶-比色法和酶-电极法1范围本标准规定了酶-比色法和酶电极法测定食品中葡萄糖的分析步骤。本标准适用于各类食品中葡萄糖的测定：亦适用于食品中其他组分转化为葡萄糖的测定。本标准的酶比色法的最低检出限量为0.01gmL:酶-电极法的最低检出限量为1.0mg/100mL。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析试验室用水规格和试验方法(GB/T6682一1992，neg1S03696:1987)3酶-比色法3.1方法提要葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催化BD葡萄糖（葡萄糖水溶液）的氧化反应，生成D葡萄糖酸-内酯和过氧化氢。受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与-氨基安替比林和苯酚生成红色醌亚胺。在波长505m处测定醌亚胺的吸光度，计算食品中葡萄糖的含量。3.2反应式CHn0,+0,G0PCH。0,+H,0,H:O+C.H;OH+Cu HuN,OPOPC.H.NO+H:O3.3试剂和溶液3.3.1试剂和分析用水所有试剂均使用分析纯试剂，或生化试剂，分析用水应符合GB/T6682规定的二级水规格，或重蒸馏水。3.3.2组合试剂盒1号瓶：内含磷酸盐级冲溶液(0.2mol/L,pH=7.0)100mL,其中4-氨基安替比林为0.00154mo/L。2号瓶：内含苯酚溶液(0.022mol/L)100mL。3号瓶：内含葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)400U(活力单位)、过氧化物醇（辣根，peroxidase)1000U(活力单位)。葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的活力要求和判定见附录A。1、2、3号瓶应在约4C保存，3.3.3酶试剂溶液将1号瓶(3.3.2)和2号瓶(3.3.2)的内容物充分混合均匀，再将3号瓶(3.3.2)的内容物溶解其中，轻轻摇动（勿剧烈摇动），使葡萄糖氧化酶和过氧化物酶完全溶解。此溶液应在约4C保存，有效期1个月。3.3.4亚铁氰化钾溶液(0.085m0l/L)称取3.7g亚铁氰化钾，溶于100mL水中，摇匀。1