食品中6-苄基腺嘌呤的测定 高效液相色谱法 GBT 23381-2009.pdf

GB/T23381-20096样品处理6.1样品提取称取经组织捣碎机捣碎的样品约10g(精确到0.01g)于50mL离心管中，加入20mL甲醇，超声提取15min,以转速不低于4000r/min离心10min,上清液转人50mL梨形瓶中，样品再次用20mL甲醇超声提取15mi,离心合并上清液，用旋转蒸发仪（不超过60C)浓缩至近干，去除甲醇，残液待净化。6.2样品净化将6.1残液以2mL/mi流速通过预先活化的固相萃取柱(4.4)，用少量水（约2mL)洗涤梨形瓶，洗液过固相萃取柱，再用5mL水洗涤固相萃取柱，去除杂质后用甲醇洗脱并定容至5.0mL,混匀后经0.45m滤膜过滤，作为待测液供HPLC分析。7高效液相色谱测定7.1HPLC参考条件a)色谱柱：Cs,250mm4.6mm,5m或相当型号色谱柱：b)柱温：30C;c)检测波长：267nm:d)流动相：甲醇：0.02mol/L乙酸铵溶液(4.5)=1：1：e)流速：1,0mL/min:D进样体积：10.0L。7.2测定分别取6-苄基腺嘌吟标准工作液和待测液10,0：L注入高效液相色谱仪进行测定，6-苄基腺嘌岭标准图谱参见图A.1。7.3结果计算样品中6-苄基腺嘌呤的含量(X)以毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)计算：X=A:XcXY1000g3n3n333595n551=（1)A1 Xm式中：X一样品中6-苄基腺隙呤的含量，单位为毫克每千克(mg/kg):A,一样品峰面积；c一6-苄基腺嘌呤标准溶液浓度的数值，单位为毫克每毫升(mg/mL):V一试样体积，单位为毫升(mL):A一标样峰面积；一样品质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字，8方法定量检出限本方法的定量检出限为：0.02mg/kg。9允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。2