第1页共3页生防木霉拮抗黄瓜枯萎病菌的初步研究木霉是一种重要的生防菌，对黄瓜枯萎病菌有很强的拮抗作用，主要作用方式有：竞争、重寄生、抗生、溶菌作用。温室盆栽试验显示，木霉可显著防治黄瓜枯萎病菌。关键词木霉;黄瓜枯萎病菌;生防木霉（trichodermaspp.）属真菌界、双核菌门、半知菌亚门、丝孢纲、丛梗孢目、丛梗孢科、真菌属，是迄今为止研究和应用最多的一类生防菌[1]。木霉的生防机制复杂，主要包括竞争、重寄生、抗生、溶菌等[2]。研究木霉对病原菌的作用机制及防治效果，可以优选木霉菌株，从而提高生防效率。1材料与方法1.1试验材料以病株上别离的黄瓜枯萎病菌（fusariumoxysporumf.sp.cucumerinum）为拮抗对象，土壤中别离的木霉菌株为拮抗菌。1.2试验方法1.2.1竞争作用。采用对峙培养法[3]，在直径为9cm的pda平板一侧接种直径为5mm的病原真菌菌丝块，在平板另一侧接种拮抗菌，28℃共培养，观察两菌的生长情况。1.2.2重寄生作用。在pda培养基中央放置1块20mm×20mm无菌盖玻片，在左侧距盖玻片40mm处接种木霉，右侧距盖玻片20mm处接种黄瓜枯萎病菌，28℃恒温培养。取下盖玻片，于显微镜下观察菌丝体的作用方式。1.2.3抗生作用。在装有20230mlpdb的三角瓶中接入直径5mm的木霉菌块，28℃、150rpm培养6d，取滤液离心后过0.22μm细菌滤器。在90ml、45℃的pda中参加2023ml上述滤液，摇匀倒成平板，接种直径为5mm的黄瓜枯萎病菌菌块。28℃恒温培养，观察生长情况。1.2.4溶菌作用。将培养4d的木霉发酵液8000rpm离心2023min。取15ml上清液倒入培养皿中，接入黄瓜枯萎病菌菌块。浅层培养5d后观察生长情况。以高温灭菌的木霉上清液中培养的病菌菌块为对照。第2页共3页1.2.5盆栽试验。将黄瓜种子经70%乙醇消毒1min，2%naclo消毒5min，55℃温水浸15~20min，25℃浸泡2~3h，无菌水冲洗3次，25~30℃下催芽1~2d。将黄瓜枯萎病菌接种到麸皮∶玉米粉为3∶1的培养基中，28℃恒温箱中培养至长满整个三角瓶。将催芽根本一致的黄瓜苗在木霉菌悬液（约1×12023cfu/ml）中浸1h，取出于灭菌滤纸片上枯燥1h后，播种于拌有黄瓜枯萎病菌制剂的土壤中。以无菌水浸种处理为对照。2结果与分析2.1竞争作用平皿对峙试验显示，木霉生长迅速，可快速占据空间，有很强的生长竞争优势，能有效抑制黄瓜枯萎病菌的生长。2.2重寄生作用显微镜下观察到木霉菌丝体缠绕着黄瓜枯萎菌丝生长，并在病菌菌丝上产生大量分枝，产生寄生作用。2.3抗生作用在pda培养基中参加2023%的木霉发...
