2022年医学专题—红细胞计数检验(1).pptx

第二章/第一节红细胞检查(jinch),第一页，共四十五页。,第二页，共四十五页。,第三页，共四十五页。,第四页，共四十五页。,正常情况(qngkung)下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。,血液中红细胞数量可 通过红细胞计数(j sh)获得,第五页，共四十五页。,红细胞计数(j sh)（red blood cell count,RBC）,测定单位(dnwi)体积血液中红细胞的数量诊断贫血及红细胞增多的指标之一红细胞计数的方法,显微镜计数法 血液(xuy)分析仪法,第六页，共四十五页。,显微镜计数法（重点）用等渗液稀释血液后，滴入血细胞计数板，计数一定(ydng)范围内的红细胞，经换算得每升血液中的红细胞数。,检测(jin c)原理,RBC未排除白细胞数量(shling)影响,第七页，共四十五页。,10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血加入2ml等渗液中，混匀混悬液充入改良牛鲍计数(j sh)板高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个中方格内的红细胞总数A。换算？,操作(cozu),RBC/L=（A/5)2510106200=(A/100)1012,第八页，共四十五页。,Neubauer计数(j sh)盘,第九页，共四十五页。,血液(xuy)分析仪法,采用电阻(dinz)抗法或激光检测法,第十页，共四十五页。,方法学评价(pngji),第十一页，共四十五页。,质量保证（显微镜法）,技术误差(wch)仪器误差分布误差,显微镜法红细胞计数(j sh)误差来源有三个,第十二页，共四十五页。,技术(jsh)误差,第十三页，共四十五页。,参考值,成年男性：（4.095.74）1012/L成年女性(nxng)：（3.685.13）1012/L新生儿：（5.26.4）1012/L婴儿：（4.04.3）1012/L儿童：（4.04.5）1012/L,RBC存在年龄与性别(xngbi)的差异,第十四页，共四十五页。,临床意义,RBC参考值上限(shngxin)，RBC增多RBC参考值下限，即贫血,生理性变化(binhu),病理性变化(binhu),第十五页，共四十五页。,生理性增多(zn du),生理性缺氧(qu yn)引起,第十六页，共四十五页。,6个月-2岁婴儿(yng r),第十七页，共四十五页。,相对性增多：见于呕吐(u t)、高热等引起暂时性血液浓缩。通过补液，血容量恢复正常，红细胞增多即消失。,绝对性增多：继发性增多，由EPO代偿性或非代偿性增高(znggo)引起。原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。,病理性增多(zn du),第十八页，共四十五页。,第十九页，共四十五页。,第二十页，共四十五页。,病理性减少(jinsho)（贫血）,生成(shn chn)减少,破坏(phui)过多,血管丢失,贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于参考值下限。病因学分类,第二十一页，共四十五页。,红细胞生成(shn chn)减少,骨髓(su)造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。,造血物质(wzh)缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。,第二十二页，共四十五页。,细胞内在缺陷(quxin)（遗传性缺陷(quxin)）膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致红细胞寿命缩短。细胞外在异常（获得性因素）免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及脾亢等。,红细胞破坏(phui)过多,第二十三页，共四十五页。,血液(xuy)丢失：急、慢性失血性贫血,第二十四页，共四十五页。,外伤(wishng)引发的出血,第二十五页，共四十五页。,血红蛋白(xuhng dnbi)（hemoglobin，Hb）,在有核红及网织红内合成是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白Hb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状合成速度(sd)受促红细胞生成素（EPO）与雄激素调节,第二十六页，共四十五页。,Hb（四聚体）,珠蛋白,血红素,2条链,2条非链,原卟啉,铁原子(yunz),血红蛋白(xuhng dnbi)组成,第二十七页，共四十五页。,第二十八页，共四十五页。,第二十九页，共四十五页。,血液中血红蛋白的存在(cnzi)形式,存在形式 所占比例还原血红蛋白（Fe2+）正常成人(chng rn)99%氧合血红蛋白碳氧血红蛋白硫化血红蛋白高铁血红蛋白（Fe3+）1%,Hb测定(cdng)即测定(cdng)血液中各种血红蛋白的总浓度。,第三十页，共四十五页。,血液的物理特性：比重法，折射仪法Hb的分子组成：全血铁法Hb与O2可逆性结合：血气(xuq)分析法Hb衍生物光谱特点：HiCN，SDS-Hb等,检测(jin c)原理,第三十一页，共四十五页。,HiCN法检测(jin c)原理,红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种血红蛋白（SHb除外）氧化为高铁血红蛋白（Hi），后者与试剂中的 CN-结合生成棕红色的氰化高铁血红蛋白（HiCN）。在540nm处测定HiCN的吸光度，直接换算(hun sun)Hb浓度或在标准曲线上查得Hb浓度。,第三十二页，共四十五页。,20ul血液加入5ml转化液中，充分溶血转化后，以转化液调零，测定标本(biobn)（HiCN）在540nm的吸光度A。计算,操作(cozu),直接计算（符合WHO标准(biozhn)的分光光度计）Hb A6445844000251A367.7以 HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光度 A在标准曲线上查出Hb浓度,第三十三页，共四十五页。,方法学评价(pngji),缺点：试剂(shj)有毒、高WBC造成试剂混浊、HbCO 转化慢、不能测SHb。,HiCN测定法（参考(cnko)方法）,优点：操作简单，反应速度快，产物稳定，便于质控。,第三十四页，共四十五页。,方法学评价(pngji),优点：操作简单(jindn)，试剂无毒，结果准确，重复性好。,缺点：SDS质量差异大；消光系数未定，不能直接(zhji)计算Hb浓度；不能测定SHb；SDS破坏白细胞。,SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）,第三十五页，共四十五页。,方法学评价(pngji),优点：试剂(shj)简易无毒、呈色稳定、准确性与精密性较高。,缺点：575nm波长(bchng)比色，血液分析仪上应用受限，不能转化HbF。,AHD575测定法,第三十六页，共四十五页。,方法学评价(pngji),优点(yudin)：准确度、精密度较高。,缺点：试剂(shj)有毒、HbCO 转化慢。,HiN3测定法,第三十七页，共四十五页。,方法学评价(pngji),优点：溶血(rn xu)强，不破坏白细胞，适用于血液分析仪。,缺点(qudin)：精密度、准确度低。,CATB测定法,第三十八页，共四十五页。,质量保证（比色法）,标本：引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高。器材及试剂：定期校准仪器(yq)，选用合格的微量采血管和刻度吸管，保证试剂质量。技术操作：控制技术误差。废弃物：妥善处理废液。,第三十九页，共四十五页。,参考值,成年男性(nnxng)：131172 g/L成年女性：113 151 g/L新生儿：180190 g/L婴儿：110120 g/L儿童：120140 g/L老年（70岁）：男性 94122 g/L 女性 87112 g/L,Hb存在年龄与性别(xngbi)的差异,第四十页，共四十五页。,临床意义（同红细胞计数(j sh)）,判断贫血程度优于红细胞计数临床应用注意事项 Hb和RBC不一定正确(zhngqu)反应全身红细胞总容量的变化。某些贫血，Hb和RBC减少程度可不一致，同时测定Hb和RBC，对诊断更有意义。,第四十一页，共四十五页。,贫血(pnxu)程度的判定,分度 Hb含量 症状 轻度：91g/L正常值下限 症状轻微中度：61g/L90g/L 活动后心悸(xnj)、气促重度：31g/L60g/L 休息时也有心悸、气促极重度：30g/L 常合并贫血性心脏病,第四十二页，共四十五页。,小结(xioji),Hb测定方法学评价(pngji),RBC显微镜计数法原理(yunl),RBC计数的临床意义,HiCN测定法原理,第四十三页，共四十五页。,谢 谢,第四十四页，共四十五页。,内容(nirng)总结,第二章/第一节红细胞检查。RBC/L=（A/5)2510106200。RBC参考值上限，RBC增多。继发性增多，由EPO代偿性或非代偿性增高引起。细胞内在缺陷(quxin)（遗传性缺陷(quxin)）。非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及脾亢等。Hb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状。Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。Hb衍生物光谱特点：HiCN，SDS-Hb等,第四十五页，共四十五页。,