肤鲜洗剂质量标准研究_邹戬.pdf

2023年 第6期广东化工第50卷 总第488期181肤鲜洗剂质量标准研究肤鲜洗剂质量标准研究邹戬，孙晓静*，张义生(武汉市中医医院 综合药学部，湖北 武汉430014)摘要目的：建立肤鲜洗剂的质量标准。方法：采用薄层色谱法(TLC)对肤鲜洗剂中地肤子、苦参、野菊花、白鲜皮进行定性鉴别；采用反向高效液相色谱法对黄柏中黄柏碱进行含量测定，色谱柱为E1921312 SinoChrom ODS-BP 5 um(4.6250 mm)，流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(每100 mL加十二烷基磺酸钠0.2 g)(3664)，流速为1.0 mL/min，检测波长为284 nm，柱温为30。结果：TLC斑点清晰，分离度良好，阴性对照无干扰；黄柏碱在进样量范围内与峰面积呈良好线性关系，相关系数均在0.9999以上，平均加样回收率为99.2%，RSD为0.57(n=6)。结论：该方法专属性较强，且快速、准确、可以作为肤鲜洗剂的质量控制标准。关键词肤鲜洗剂；质量标准；薄层鉴别；黄柏碱中图分类号TQ文献标识码A文章编号1007-1865(2023)06-0181-03Quality Standard of Fuxian LotionZou Jian,Sun Xiaojing*,Zhang Yisheng(Wuhan Hospital of Traditional Chinese Medicine,General Pharmaceutical Department,Wuhan 430014,China)Abstract:Objective:To establish the quality standard of Fuxian Lotion.Methods:TLC was used to qualitatively identify Radix Scutellariae,Radix SophoraeFlavescentis,Chrysanthemum indicum and Cortex Dictamni in Fuxian Lotion,and RP-HPLC was used to determine the content of Phellodendrine in PhellodendronPhellodendri.The chromatographic column was E1921312 SinoChrom ODS-BP 5 um(4.6250 mm),and the mobile phase was acetonitrile-0.1%phosphoric acidsolution(every 100 mL with sodium dodecyl sulfonate 0.2 g)(3664),flow rate of 1.0 mL min-1,detection wavelength of 284 nm,column temperature of 30.Results:TLC spots were clear,the separation was good,and the negative control had no interference.Phellodendrine showed a good linear relationship with peakarea in the range of sample volume,the correlation coefficients were above 0.9999,the average recovery rate was 99.2%,RSD was 0.57(n=6).Conclusion:Themethod is specific,fast and accurate,and can be used as the quality control standard for Fuxian Lotion.Keywords:FuXian Lotion；quality standard；TLC identification；phellodendrine肤鲜洗剂为武汉市中医医院皮肤科外用洗剂，由地肤子、白鲜皮、黄柏、苦参、野菊花等九味中药组成。该方经过二十年的临床验证，其疗效确切，质量稳定，其具有清热解毒、燥湿止痒的功效，临床上主要用于湿热、虫毒所致郁滞性皮肤疾病的治疗，如湿疹、癣。症见皮肤红、肿、热、痛、痒，或伴有渗液，舌红苔滑或腻，脉弦或数。地肤子中主要活性成分为三萜皂苷类成分，其主要药理作用为抗过敏、抗瘙痒、消炎等，临床常用于治疗瘙痒、湿疹等皮肤科疾病1。白鲜皮主要药理作用为抗菌、抗炎、抗变态反应、抗肿瘤、抗溃疡、抗冠状动脉粥样硬化等，与药理作用密切相关的主要活性成分为白鲜碱、梣酮和黄柏酮等2。野菊花中含有黄酮类、萜类及挥发油类等成分，具有免疫抗炎、肝保护、抗菌、抗氧化等作用3。黄柏中主要含生物碱类、黄酮类、酚类衍生物等化合物4-5，其中生物碱类的含量比较高，也是其主要的活性成分，目前对黄柏的研究较多，目前已有大量的研究报道黄柏的药理作用，其对免疫系统具有调节作用，对肠管也有一定的影响，临床上常用于降血糖，降血压，亦有抗菌、抗炎、解热作用，抗癌作用，抗溃疡作用，抗氧化作用等。苦参的药理作用主要为抗寄生虫、抗菌作用、抗病毒作用等6。百部具有杀虫、抗菌以及止咳、化痰、平喘等作用7-8。为了更好的控制本制剂品种的质量，本实验采用薄层色谱法对方中地肤子、苦参、野菊花、白鲜皮进行定性鉴别，同时采用反向高效液相色谱法，建立肤鲜洗剂中黄柏碱的含量测定，为肤鲜洗剂的质量控制提供科学依据，为临床用药提供指导。1仪器与试药仪器与试药1.1仪器岛津LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津)、LC Solution色谱工作站；TLC Scanner4薄层扫描仪(CAMAG瑞士卡玛)；岛津AUW-120D电子天平(日本岛津)；AL104梅特勒-托利多电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；KQ3200B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；超纯水机QYYS-20A(重庆前沿水处理设备有限公司)；数显恒温水浴锅HH-4(常州国华电器有限公司)。1.2试药地肤子皂苷Ic(中国药品生物制品检定研究所，批号：111723-201103，91.5%)，苦参碱(中国药品生物制品检定研究所，批号：110805-200508)，槐定碱(上海源叶生物科技有限公司，批号：Y02M8Y17832，98%)，蒙花苷(上海源叶生物科技有限公司，批号：J31M8T36960，98%)，野菊花对照药材(中国药品生物制品检定研究所，批号：120995-201506)，黄柏酮(中国药品生物制品检定研究所，批号：111923-201604，99.6%)，盐酸黄柏碱(中国药品生物制品检定研究所，批号：111895-201504，94.9%)，水为纯化水，甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。肤鲜洗剂(由武汉市中医药学基地制剂中心提供，批号为：20200924、20200928、20201014，规格：200 mL/瓶)。2方法与结果方法与结果2.1 TLC鉴别2.1.1地肤子鉴别取本品30 mL，置于分液漏斗中，用乙酸乙酯20 mL萃取，萃取2次，合并2次乙酸乙酯萃取液，蒸干，加甲醇定容至1 mL，作为供试品溶液。精密称取地肤子皂苷c对照品0.5 mg，加甲醇定容至1 mL，作为对照品溶液。取缺地肤子的肤鲜洗剂30 mL按供试品溶液的配制方法同法制备，作为阴性样品溶液。照薄层色谱法(2020年版中国药典四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各1020 L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(1692)为展开系统展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与地肤子皂苷c对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰，结果见图1。收稿日期2023-03-05基金项目武汉市卫生和计划生育委员会科研项目(WZ18E02)；武汉市中青年医学骨干人才培养工程(武卫通202055号)作者简介邹戬(1984-)，男，湖北武汉人，硕士，主管中药师，主要研究方向为中药制剂。*为通讯作者：孙晓静(1985-)，女，湖北武汉人，硕士，主管中药师，主要研究方向为中药制剂、中药炮制。广东化工2023年 第6期第50卷 总第488期1、2、3供试品(批号：20200924、20200928、20201014)；4、地肤子皂苷Ic对照品；5、缺地肤子阴性样品图图1地肤子的鉴别地肤子的鉴别Fig.1Identification of Fructus kochiae2.1.2苦参鉴别取本品30 mL，加适量氨试液调节溶液pH值至9，用三氯甲烷20 mL萃取，萃取2次，合并2次三氯甲烷萃取液，蒸干，加乙醇定容至1 mL，作为供试品溶液。精密称取苦参碱对照品、槐定碱对照品各0.2 mg，加乙醇定容至1 mL，作为混合对照品溶液。取缺苦参的肤鲜洗剂30 mL按供试品溶液的配制方法同法制备，作为阴性样品溶液。照薄层色谱法(2020年版中国药典四部通则0502)试验，吸取上述三种溶液各4 L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-甲醇(830.5)为展开系统，置氨蒸气饱和的层析缸内展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾溶液显色，日光下检视。供试品色谱中，在与苦参碱、槐定碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰，结果见图2。1、2、3供试品(批号：20200924、20200928、20201014)；4、苦参碱、槐定碱混合对照品；5、缺苦参阴性样品图图2苦参的鉴别苦参的鉴别Fig.2Identification of Sophora flavescens2.1.3野菊花鉴别取本品10 mL，加硅藻土5 g拌匀，加甲醇15 mL，超声处理(400 W，50 kHz)30分钟，放冷，滤过，取滤液作为供试品溶液。取野菊花对照药材0.3 g，按供试品溶液的配制方法同法制备，作为对照药材溶液。精密称取蒙花苷对照品0.2 mg，加甲醇定容至1 mL，作为对照品溶液。取缺野菊花的肤鲜洗剂10 mL按供试品溶液的配制方法同法制备，作为阴性样品溶液。照薄层色谱法(2020年版中国药典四部通则0502)试验，吸取上述四种溶液各3 L，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水(1515641)为展开系统展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝溶液显色，热风吹干，置365 nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与野菊花对照药材色谱和蒙花苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰，结果见图3。1、2、3供试品(批号：20200924、20200928、20201014)；4、野菊花对照药材；5、蒙花苷对照品；6、缺野菊花阴性样品图图3野菊花的鉴别野菊花的鉴别Fig.3Identification of Mother chrysanthemum2.1.4白鲜皮鉴别取本品30 mL，加硅藻土10 g拌匀，加甲醇20 mL，超声处理(400 W，50 kHz)30分钟，滤过，滤液蒸干，加甲醇定容至1 mL，作为供试品溶液。精密称取黄柏酮对照品1 mg，加甲醇定容至1 mL，作为对照品溶液。取缺白鲜皮的肤鲜洗剂30 mL按供试品溶液的配制方法同法制备，作为阴性样品溶液。照薄层色谱法(2020年版中国药典四部通则0502)试验，吸取上述溶液各10 20 L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-环己烷-乙酸乙酯(333)为展开系统展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与黄柏酮对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰，结果见图4。1、2、3供试品(批号：20200924、20200928、20201014)；4、黄柏酮对照品；5、缺白鲜皮阴性样品图图4白鲜皮的鉴别白鲜皮的鉴别Fig.4Identification of Cortex dictamni2.2黄柏含