河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿维菌素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 GBT 22953-2008.pdf

GB/T22953-2008河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿维菌素残留量的测定液相色谱-串联质谱法1范围本标准规定了河豚鱼、鳗鱼和烤馒中阿维菌素类药物伊维菌素(ivermectin)、阿维菌索(abamec-tin)、多拉菌素(doramectin)和乙酰氨基阿维南菌素(eprinomectin)残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于河豚鱼肌肉、鳗鱼肌肉、烤馒中伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿维菌素残留量的测定，本标准的方法检出限：河豚鱼肌肉、鳗鱼肌肉、烤毁中伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿维菌素均为5g/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6379.1测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分：总则与定义(GB/T6379.1-2004,1S05725-1:1994,IDT)GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法(GB/T6379.2一2004，IS05725-2:1994,IDT)GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一2008，IS03696:1987,MOD)3原理河豚鱼、鳗鱼和烤毁中残留的伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿维菌素残留用乙腈提取后，正已烷脱脂，中性氧化铝柱净化。样品溶液供液相色谱-串联质谱仪检测，外标峰面积法定量。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1乙睛：色谱纯。4.2甲醇。4.3正己烷，使用前以乙晴饱和。4.4中性氧化铝：活度I级。4.5无水硫酸钠：经650C灼烧4h,置于干燥器中备用。4.6中性氧化铝净化柱：取一空的固相萃取柱管，下部填入少量脱脂棉，装入2g中性氧化铝(4.4)，上部再填充4g无水硫酸钠，使用前装填。4.7伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素、乙酰氨基阿维菌素标准物质：纯度99%。4.8100g/mL标准储备液：准确称取适量的伊维菌素、阿维菌素，多拉菌素和乙酰氨基阿维菌素标准品（精确至0.1mg),用乙腈分别配制成100g/mL的标准贮备液，一18C储存。GB/T22953-2008d)流速：0.8mL/min:)流动相：甲醇+水，梯度洗脱，见表1。表1梯度洗脱程序时间/min甲醇/%水/%0.0075253.00100010.00100010.01752515.0075267.3.2质谱参考条件)离子源：电喷雾电离源(ES):b)扫描方式：负离子扫描：c)检测方式：多反应监测(MRM):)雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氨气及其他合适气体；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，喷雾电压、去集簇电压、碰撞能等电压值应优化至最佳灵敏度；e)监测离子对和相应的参考质谱参数，见表2。表2伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿维菌素的监测离子对和相应的参考质谱参数定性离子对定量离子对采集时间/去筷电压/碰撞能量化合物名称(川/x)(m/e)ms873.7/567.8-37伊维菌素873.7/229.2100-75873.7/229.2-50871.7/565.2-40阿维曲素871.7/565.2100-80871.7/229.3-54897.6/591.4-38多拉菌素897.6/591.2100-70897.6/229.0-51912.5/270.0-49乙酰氨基阿维菌素912.5/565.4100-82912.5/565.4-377.3.3液相色谱-串联质谱测定7.3.3.1定性测定每种被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同试验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差在土2.5%之内：且样品谱图中各组分定性离子的相对离子丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对离子丰度进行比较，偏差不超过表3规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差以%表示相对离子丰度KK5020K5010K20K10允许最大偏差2025土30土507.3.3.2定量测定外标法定量：在仪器最佳工作条件下，对基质混合标准工作溶液进样(4.10)，以峰面积为纵坐标，基3