河豚鱼和鳗鱼中头孢唑啉、头孢匹林、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢喹肟残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 GBT 22960-2008.pdf

GB/T22960-2008河豚鱼和鳗鱼中头孢唑啉、头孢匹林、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢喹肟残留量的测定液相色谱-串联质谱法1范围本标准规定了河豚鱼和雙鱼中头孢唑林、头孢匹林、头孢氨半、头孢洛宁、头孢喹肟残留量的液相色谱串联质谱测定方法。本标准适用于河豚鱼和鳗鱼中头孢唑啉、头孢匹林、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢喹肟残留量的测定。本标准的方法检出限：头孢唑啉为10gkg:头孢匹林、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢喹肟为2.0g/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，技励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6379.1测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分：总则与定义(GB/T6379.1一2004,1S05725-1:1994,IDT)GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法(GB/T6379.2一2004，IS05725-2:1994,1DT)GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一2008，IS03696:1987,M0D)3原理试样中五种头孢荫菌素药物残留用乙腈提取，旋转蒸发除去乙腈，用水定容，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯。4.1水：GB/T6682,一级。4.2甲醇：色谱纯。4.3乙腈：色谱纯。4.4乙酸。4.5正己烷。4.6乙腈饱和的正己烷：取100mL正己烷(4.5)和50mL乙腈(4.3)于250mL分液漏斗中，振摇1mi,静置分层后，弃掉乙腈。4.7标准物质：头孢唑啉(CAS:25953-19-9)、头孢匹林(CAS:24356-60-3)、头孢氨卡(CAS:16549-56-7)、头孢洛宁(CAS:5575-21-3)、头孢喹肟(CAS:118443-89-3),纯度99%。4.81.0mg/L五种头孢菌素标准储备溶液：准确称取适量的每种标准物质(4.7)，分别用水配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。储备液贮存在一18冰柜中。4.9五种头孢菌素标准混合工作溶液：根据需要吸取适量的每种头孢菌素标准储备溶液(4,8)，用水稀释成适当浓度的标准混合工作溶液，1GB/T22960-20084.10滤膜：0.2m。5仪器5.1液相色谱-串联四极杆质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2分析天平：感量0.1mg,0.01g。5.3均质器。5.4微量注射器：25L,100L。5.5刻度样品管：5mL,精度为0.1mL.5.6高速冷冻离心机：带有50mL具塞离心管，转速达到10000r/min以上。5.7氮气浓缩仪。6试样制备与保存6.1试样的制备从全部样品中取出有代表性样品约1kg,充分搅碎，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封后作为试样，标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。6.2试样的保存将试样于一18C保存。7测定步骤7.1试样溶液的制备称取5g试样（精确到0.01g)置于50mL离心管中，加入20mL乙腈(4.3），使用均质器(5.3)均质1min,提取液使用高速冷冻离心机(5.6)在10，10000r/min离心10min,把上层提取液移至另一离心管中。用15mL乙腈重复提取一次，合并两次的提取液，并加人10mL乙腈饱和的正己烷(4.6)，振荡1mi,弃掉正己烷。把提取液移至100mL鸡心瓶中，在40旋转蒸发除去乙晴，用2mL水溶解残渣，摇匀后，样液过0.2m滤膜(4.10)，供液相色谱-串联质谱仪测定。7.2空白样品添加标准混合工作溶液的制备分别准确移取适量五种头孢菌素标准混合工作溶液(4.9)，添加到5.0g样品中，按照7.1步骤操作，制得头孢唑啉浓度分别为10g/kg、20g/kg、40g/kg、100g/kg:头孢匹林、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢喹肟浓度分别为2.0g/kg、4.0g/kg、8.0g/kg、20g/kg四个样品添加标准混合工作溶液，供液相色谱-串联质谱仪测定。7.3测定条件7.3.1液相色谱参考条件a)色谱柱：ZORBAX SB-Cs,3.5m,150mmX2.1mm(内径)或相当者：b)流动相组成、流速及梯度程序见表1：c)柱温：30：d)进样量：20L表1流动相梯度程序及流速时间/min流速/(L/min)水（含0.1%乙酸）/%乙睛/%0.0020095.05.02.0020095.05.02.0120040.060.0