果糖二磷酸钠(FDP)含量测定用固体复合酶(ALD、TIM、GDH)试剂 GBT 32226-2015.pdf

1CS71.040.30G66中华人民共和国国家标准GB/T32226一2015果糖二磷酸钠(FDP)含量测定用固体复合酶(ALD、TIM、GDH)试剂Specific solid enzyme(ALD,TIM,GDH)reagent fordetermination of fructose diphosphate(FDP)2015-12-10发布2016-07-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T32226-2015TIM:磷酸丙糖异构酶4技术要求4.1组成本固体复合酶由醛缩酶(ALD)、磷酸丙糖异构酶(TIM),甘油磷酸脱氢酶(GDH)组成。各组分的重量份是：ALD(醛缩酶)20%25%，TIM(磷酸丙糖异构酶)30%40%，GDH(甘油醉酸脱氢酶)30%35%.4.2感官要求本品为浅红色或类白色冻干粉，溶于三羟甲基氨基甲烷溶液(0.1mol/L,pH7.6)。4.3理化要求固休酶活力不小于40g/(minmg)。4.4卫生要求符合GB19489的要求。5试验方法除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的三级（含三级）以上的水。5.1外观肉眼观察为浅红色或类白色冻干粉。5.2固体复合酶活力的测定5.2.1原理本产品是以动物肌肉为主要原料生产的含ALD、TIM和GDH的复合酶试剂。FDP在NADH的存在下，先后经ALD、TIM和GDH的作用，一分子FDP能使两分子NADH氧化成DAN,引起NADH反应前后在340nm处吸光度发生变化，在线性范围内，通过测定NADH在单位时间内产生的吸光度变化值，可计算固体复合酶的活力。5.2.2试剂和溶液5.2.2.1盐酸三乙醇胺缓冲液(0.4mol/LpH7.6):取盐酸三乙醇胺18.6g,加水200mL溶解，加3.7g乙二胺四乙酸二钠，溶解后，用2mol/L氢氧化钠（约18mL)调节pH至7.60，加水稀释至250mL。或取17.5g三乙醇胺，加水约200mL,加盐酸4mL,混匀，加3.7g乙二胺四乙酸二钠，溶解后，用2mol/L氢氧化纳溶液或2mol/L盐酸溶液调节pH至7.6，加水稀释至250mL。过滤后4保存，一周内使用，5.2.2.2复合酶溶液：取固体复合酶0.1g加盐酸三乙醇胺缓冲液(pH7.6)溶解并稀释至10mL。重熔漏斗过滤，4下保存。5.2.2.3还原型辅酶I溶液：取还原型轴酶I6.5mg,加盐酸三乙醇胺缓冲液溶解，并稀释至50mL,