化学品 藻类生长抑制试验 GBT 21805-2008.pdf

1CS13.300:13.020.40A80GB中华人民共和国国家标准GB/T21805-2008化学品藻类生长抑制试验Chemicals-Alga growth inhibition test2008-05-12发布2008-09-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T21805-2008化学品藻类生长抑制试验1范围本标准规定了化学品藻类生长抑制试验的方法概述、试验准备、试验程序、质量保证与质量控制、数据与报告。本标准适用于测试试验条件下溶于水的化学品。如果要测试挥发性，强吸附性、有颜色、不溶或难溶于水的化学品，以及可能影响培养基中营养物质有效利用的化学品，需要对所述试验程序进行修改(如采用密闭系统、适当的试验容器)。参考文献2、3和4提供了部分修改方案。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1生物量biomass单位体积试验介质内活体生物的干重，例如毫克藻每升试验溶液。生物量通常被定义为质量，但在本标准中，定义为单位体积的质量，且以单位体积内细胞数量或荧光性等的测定替代生物量的测定。2.2变异系数coefficient of variation标准差与平均数之比，通常以百分比表示，记作CV%。变异系数是一个无量纲的数，因而便于样本间的相互比较。对照组各平行平均比生长率的变异系数的平均值按以下方式计算：)分别计算试脸各阶段各平行的平均比生长爷：b)计算试验各阶段对照组各平行平均比生长率的变异系数的平均值。2.3效应浓度EC:引起受试生物生长或生长率比对照下降x%(如50%)时的受试物浓度。EC有基于生长率的E,C和基于生长量的E,C之分。2.4藻类生长培养基growth medium含有特定营养成分的液体或胶状物质。藻类在培养基中生长并暴露于受试物。通常是将受试物溶于培养基中。2.5生长率growth rate即平均比生长米(average specific growth rate),是暴露期间藻类生物量的指数增长常。2.6最低可观察效应浓度lowest observed effect concentration:LOEC在一定暴露期内，与对照相比，对藻类生长有明显(p0.05)抑制效应的最低受试物设置浓度。高于LOEC的所有试验浓度均可观察到与LOEC时相同的或更严重的毒性影响。如果未满足上述条件，应就IOEC(以及NOEC)的选择进行详细说明。2.7无可观察效应浓度no observed effect concentration:NOEC直接低于最低可观察效应浓度(1OEC)的受试物设置浓度。1GB/T21805-2008彻底清洗并灭菌。试验容器为具有一定容积的玻璃瓶，如三角瓶，以保证试验期间有足够的试验液用于测试，同时也保证CO2的充分交换（要有一定的表面积-体积比：125mL三角瓶中试验液的体积应为40mL60mL,250mL三角瓶应为70mL100mL,500mL三角瓶应为100mL150mL.)注意必须保证有足够的液体用作分析测定。为了防止有机或无机污染物影响藻类的生长和培养基的组成，容器应用棉塞、海绵塞、滤纸、纱布(2层一3层)、锡箔纸等封闭。挥发性化学品试验时应用磨口玻璃塞完全密封。同一批试验的容器应规格一致。5.2培养设备使用可控制温度在士2范围内的光照培养箱。5.3照度计测定光照强度的仪器：注意，光照强度的测定方法非常重要，使用不同类型的光接受器得到的结果可能不同。最好使用4的球面照度计（可接受来自各方向各角度的直射或反射光照）或2球面照度计（可接受来自上方各角度的直射或反射光照）。5.4测定藻类生物量的仪器设备细胞计数是最常用的替代参数，用于计数的仪器设备主要有电子颗粒计数仪、显微镜、浮游植物计数框或血球计数板、手动计数器等。应明确细胞计数和干重之间的转换关系，也可使用分光光度计、比色计，荧光计、流动细胞计数仪等测定其他替代参数。为了在低生物量时进行有效测定，使用分光光度计吸收池的光径必须至少为4m。5.5其他仪器设备一pH计：一电子分析天平；一高压灭菌锅；一机械振荡器等，6试验准备6.1受试生物6.1.1受试生物的选择选择一些不易附着于瓶壁上的绿藻和蓝藻作为受试生物。a)绿藻一羊角月芽藻(Pseudokirchneriella subca pitata):一栅藻(Desmodesmus subs picatus）;一普通小球藻(Chlorella vulgaris)。b)硅藻一舟形藻(Navicula pelliculosa),c)蓝藻一水华鱼腥藻(Anabaena flos-aquae):一聚球藻(Synechococcus leopoliensis)。上述藻类的详细信息见附录A。也可选用其他藻类，但应在报告中说明其品系和（或）来源，并确保在试验期间相应的试脸条件下保持指数生长，