化学品 体内哺乳动物肝细胞非程序性DNA合成(UDS)试验方法 GBT 21767-2008.pdf

GB/T21767-2008化学品体内哺乳动物肝细胞非程序性DNA合成(UDS)试验方法1范围本标准规定了化学品体内哺乳动物非程序性DNA合成试验的范围，术语和定义、试验基本原则、试验方法、试验数据和报告。本标准适用于检测能诱发实验动物肝细胞DNA损伤和修复的化学物质。2术语和定义、缩略语2.1术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1.1修复期细胞cells in repair指净核银粒(NNG)高于本试验室历史阴性对照值的细胞。2.1.2净核银粒net nuclear grains(NNG)UDS试验中，用于定量测定放射自显影细胞内UDS活性的方法，通过核银粒数(NG)减去等于核面积的细胞质内银粒平均数(CG)来计算，即NNG=NG一CG。通常先计算每一个细胞的NNG,再将一个培养物或平行培养物中细胞的NNG汇总。2.1.3非程序性DNA合成unscheduled DNA synthesis(UDS)化学物质或物理因素引起DNA受损后进行的DNA修复合成，与按细胞周期进展程序而发生的S期半保留DNA合成不同，称为非程序性DNA合成。2.2缩略语下列缩略语适用于本标准。EINECS(European Inventory of Existing Commercial Chemical Substances):欧洲现有商业化学品目录NG(nuclear grains):核银粒数CG(cytoplasmic grains).:细胞质银粒数3试验基本原则体内哺乳动物非程序性DNA合成试验的目的是为了鉴定能诱发染毒动物肝细胞DNA修复的物质，体内试验提供了一种研究化学物质肝脏遗传毒性效应的方法，测试的终点表明肝细胞发生DNA损伤及随后发生的修复。肝脏是机体吸收的化学物质代谢的主要器官，因此肝脏是检测体内DNA损伤的适宜部位。化学或物理因素诱发DNA损伤后，细胞启动非程序性DNA合成程序以切除或移除DNA损伤的区域，体内哺乳动物肝细胞UDS试验就是检测受损DNA的修复合成过程。肝细胞周期中处于S期的频率很低，因此试验通常用放射自显影技术检测氚标记的胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TR)摻入肝细胞1