公共场所茶具微生物检验方法 细菌总数测定 GBT 18204.2-2000.pdf

GB/T18204.2-20004.12pH计或精密pH试纸。5培养基和试剂5.1生理盐水5.1.1成分：氯化钠8.5g蒸馏水1000mL5.1.2制法：将氯化钠(8.5g)溶解于蒸馏水(1000mL)中，分装到试管内，每管10mL,121C20min高压灭菌。5.2营养琼脂见GB/T18204.1一2000中第4章第1节。6检验程序细菌总数检验程序如下：检样振摇各1mL人二块灭菌平36C士1C48h菌落计数报告7操作步骤7.1采样方法7.1.1随机抽取清洗消毒后准备使用的茶具。7.1.2用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在茶具内、外缘，涂抹50cm2,即11.5cm高处一圈（口唇接触处)。用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放入10mL生理盐水内，4h内送检。7.2检验方法7.2.1将放有棉拭子的试管充分振摇。此液为1：10稀释液。7.2.2以无菌操作，吸取2mL检样，分别注入到两块灭菌平皿内，每皿1mL。如污染严重，可十倍递增稀释，即吸取1mL加到9mL灭菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液。每个稀释度做两块平皿。7.2.3将已融化冷至45左右的营养琼脂培养基倾入平皿，每皿约15mL,并立即旋摇平皿。冷凝后放36C士1C培养箱培养48h。8菌落计数方法作平皿菌落计数时，可用肉眼直接观察，必要时用放大镜检查以防遗漏，在记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落，该平皿不宜计数；若片状菌不到平皿中的一半，而其余一半中菌落分布均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，所得结果代表全皿菌落数。实际公用茶具菌落数，按式(1)计算：GB/T18204.2-2000a=b.n48468464488448448488(1）50式中：a一细菌总数，cfu/cm2;b一平均菌落数：一稀释倍数。9菌落计数的报告9.1选择平均菌落数在30300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告（见表1中例1）。9.2若有两个稀释度，其平均菌落数均在30300之间，则由两菌落总数之比值来决定，若其比值小于或等于2，应报告其平均数，若大于2，则报告其中稀释度较低的平皿菌落数（见表1中例2、例3）。9.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1中例4)。9.4若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例5)。9.5若所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间，其中一个稀释度平均菌落数大于300，而相邻的另一个稀释度平均菌落数小于30，则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中例6)。9.6若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每毫升小于1cfu(见表1中例7)。9.7菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五人法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示（见表1中报告方式栏)。在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。表1细菌计数结果及报告方式不同稀释度平均菌落数两稀释度苗落总数报告方式例次10-110-210-3菌数之比cfu/mLcfu/mL1136516420一1640016000或1.61022760295461.63800038000或3.81032890271602.22710027000或2.7104不可计4650513513000510000或5.1103527115一270270或2.71026不可计305123050031000或3.11000001