化学品 体外哺乳动物细胞姊妹染色单体交换试验方法 GBT 27820-2011.pdf

GB/T27820-2011化学品体外哺乳动物细胞姊妹染色单体交换试验方法1范围本标准规定了化学品体外哺乳动物细胞姊妹染色单体交换试验方法的术语和定义，试验原则、试金方法、试验数据和报告。本标准适用于化学品休外哺乳动物细胞姊妹染色单体交换试验。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1姊妹染色单体交换sister chromatid exchange,SCE细胞分裂复制期单个染色体内的两个染色体单体的相互交换。在细胞分裂中期相可见到这种交换，它可能需要DNA双螺旋的酶切、转移和连接。3试验原则哺乳动物细胞在加人和不加人外源性代谢活化系统条件下，在含有受试物和溴代脱氧尿猪啶(omodeoxyuridine,BrdU)的培养液中，连续培养两个细胞周期。加人纺锤体抑制剂（如秋水仙素），将分裂的细胞汇聚停留在中期分裂相样阶段，收获细胞、制备染色体。4试验方法4.1准备4.1.1受试物应提供受试物的物态、纯度、溶解性、熔点/沸点、pH值（如果适用）、蒸气压（如果有）等资料。应在细胞染毒前准备好含有受试物的培养基或将受试物溶解在合适的介质中，受试物应新鲜配制。介质的终浓度不能显著影响细胞活性、生长率和SCE频率。4.1.2细胞和培养方法可使用原代培养细胞（如人林巴细胞）或已建立的细胞系（如中国仓鼠卵巢细胞或啡细胞）。细胞系应保证无支原体污染和核型稳定，采用合适的培养基和培养条件（如温度、培养皿、CO2浓度和湿度）。4.1.3代谢活化分别在有/无合适的哺乳动物代谢活化系统条件下用受试物对细胞染毒。常用的代谢活化系统有酶诱导剂诱导过哺乳动物肝匀浆微粒体酶系统并加人辅助因子配制成的活化系统，以及原代培养的哺