p-STAT3、PD-L1...表达及与临床病理特征的关系_牟东云.pdf

论著临床研究 ：网络首发 ：（）、在膀胱尿路上皮癌中的表达及与临床病理特征的关系牟东云，张艳金，蒋立人，孙娟娟，曹毅，高峰（上海市第一人民医院病理中心 ；遵义医药高等专科学校病理教研室，贵州遵义 ；贵州航天医院骨一科，贵州遵义 ；遵义医药高等专科学校卫管流行病与卫生统计学教研室，贵州遵义 ）摘要目的探讨磷酸化信号转导和转录活化因子（）、程序性死亡分子配体（）在膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组的表达及其临床意义。方法选取上海市第一人民医院病理中心 年月至 年 月病理诊断的膀胱高级别浸润性尿路上皮癌患者 例，采用免疫组织化学法检测 、表达情况；采用 相关分析膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织 、表达相关性；收集患者临床病理资料，分析 、表达与患者临床病理特征的关系。结果膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织 、阳性率分别为 、；膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织 与 表达呈正相关（，）；、阳性表达与患者肿瘤分期有关（）。结论膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织 、表达上调，可能参与 的表达调控。关键词膀胱癌；信号转导及转录激活因子；磷酸化；程序性死亡受体配体；临床病理特征；免疫组织化学 中图法分类号 文献标识码 文章编号 （），（.，；.，；.，；.，）（）（），（）（，）（），重庆医学 年月第 卷第期基金项目：遵义市科技合作项目 字（）；遵义市科技创新人才团队项目（号）。作者简介：牟东云（），主治医师讲师，硕士，主要从事膀胱癌临床病理诊断及基础研究。通信作者，：。；全球每年膀胱癌新发病例居常见癌症第 位，约为 万，且男性约为女性的倍，男性发病率和病死率分别位居男性癌症的第位和第位，膀胱癌严重威胁着人们的健康。膀胱尿路上皮癌是最常见的组织学类型，尤其高级别浸润性尿路上皮癌，侵袭性强、进展快，预后更差。目前，膀胱癌的一线治疗方案是基于顺铂的化疗，然而对于顺铂耐药和因肾功能不全不能耐受治疗的患者，治疗效果较差。近年来，新型免疫治疗程序性死亡分子程序性死亡分子 配 体（，）抑制剂可阻断 诱导的免疫抑制，防止肿瘤发生免疫逃逸，成为治疗膀胱癌的又一大利器，显示了良好的抗肿瘤活性，其不足之处为存在总体反应率较低、副作用较大及耐药等问题，因此，亟须对 的调控机制进行深入研究，以期找到更有效的治疗或联合治疗靶点。信号转 导 和 转 录 活 化 因 子（，）家族是一种具有信 号 转 导 和 转 录 调 控 双 重 功 能 的 蛋 白 家 族。是 家族成员之一，在多种恶性肿瘤中异常激活，被视为“癌基因”，参与肿瘤细胞增殖、血管生成及侵袭转移等过程。在肺腺癌研究中发现，磷酸化 （）和 具有较高的表达率且二者呈正相关。目前国内外关于膀胱癌 、表达情况及临床意义的研究较少。本研究以膀胱高级别浸润性尿路上皮癌患者为研究对象，采用免疫组织化学（）法检测肿瘤组织中 、表达情况，并分析二者的相关性，以及二者与临床病理特征的关系，以期为膀胱癌 抑制剂联合 靶向治疗的应用寻找理论依据。资料与方法 一般资料选取上海市第一人民医院病理中心 年月至 年 月病理诊断膀胱高级别浸润性尿路上皮癌患者 例，取膀胱癌石蜡标本切片，由两名经验丰富的高年资医师独立复片，排除分歧病例，重复活检患者只纳入首次标本。患者临床资料：男 例，女 例；年龄 岁，中位年龄 岁；根据 年国际抗癌联盟（，）膀胱癌 分期（第版），期例、期 例、期 例、期 例；有淋巴结转移者例，无淋巴结转移者 例。本研究经本院伦理委员会审核通过，所有受试者均知情同意。方法 主要试剂兔抗人 、抗体均购自武汉爱博泰克生物科技有限公司，乙二胺四乙酸（）抗原修复液、二抗和二氨基联苯胺（）显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。检测 染色采用 法。切片后经二甲苯常规脱蜡、无水乙醇水化后，应用过氧化氢灭活组织内的内源性过氧化物酶，将切片浸入 抗原修复液进行高压抗原修复。滴加兔抗人 、一抗及生物素标记的二抗工作液，显色、苏木素复染，常规脱水，透明、中性树胶封片。同时设置阳性和阴性对照。结果判定本组病例采 用 肿瘤 细 胞 阳性比例评分（，）进行评估。以肿瘤细胞质 及 细 胞 核 染 成 棕 黄 色 为 阳 性，阳 性 阈 值 为 ；以肿瘤细胞核染成棕黄色为阳性，阳性阈值为 ；以肿瘤细胞膜出现任何强度的棕黄色为阳性，阳性阈值为。由两位经验丰富的病理医师采用双盲法进行结果评估，取两次读数的均数为最终结果。统计学处理采用 软件进行数据统计分析。计数资料以例数或百分比表示，比较采用检验；相关性分析应用 相关；取双侧检验，以 为差异有统计学意义。结果 、的表达情况膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织镜下特征主要表现：肿瘤细胞层次增多，极向紊乱，核大深染、核仁显著、病理性核分裂象易见等，肿瘤呈浸润性生长。免疫组织化学染色显示：肿瘤细胞核染成棕黄色，肿瘤细胞膜和免疫细胞膜染成棕黄色，、阳性率分别为 、。见图。与 的相关性分析 相关性分析显示：膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织 和 表达呈正相关（，）。、表达与临床病理特征的关系膀胱高级别浸润性尿路上皮癌 、阳性表达与患者肿瘤分期有关（），与患者性重庆医学 年月第 卷第期别、年龄、增殖指数、淋巴结转移无明显相关性（），见表。：组织病理（苏木素伊红染色）；：细胞质核阳性（）；：细胞膜阳性（）。图高级别浸润性尿路上皮癌病理及 染色图像表膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织 、表达与临床病理特征的关系，（）项目 阴性（）阳性（）阴性（）阳性（）性别 男 （）（）（）（）女 （）（）（）（）年龄 岁 （）（）（）（）岁 （）（）（）（）增殖指数 （）（）（）（）（）（）（）（）肿瘤分期 期 （）（）（）（）期 （）（）（）（）期 （）（）（）（）淋巴结转移 无 （）（）（）（）有（）（）（）（）讨论膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其中尿路上皮癌是最常见的组织学类型，根据是否突破基底膜分为浸润性和非浸润性。根据 版肿瘤分级方法，膀胱尿路上皮肿瘤可分为低度恶性潜能的乳头状尿路上皮肿瘤、低级别尿路上皮癌、高级别尿路上皮癌。肿瘤的浸润性和分级情况与患者的复发、进展等有密切关系，高级别浸润性尿路上皮癌侵袭性强、进展快，预后极差，故本研究选择此类尿路上皮癌患者为研究对象。既往研究表明，在正常生理状态下，激活受严格控制，然而在包含膀胱癌在内的多种肿瘤中均发现，呈过度激活和高水平表达。异常激活即 磷酸化后形成二聚体增多，二聚体进入细胞核与靶基因结合，对下游靶基因（如 、和 等基因）的转录进行调控，参与调节细胞增殖、血管生成、侵袭转移等多种恶性特征，。因此，被认为是重要的致癌信号通路。近年有研究报道，致癌信号通路不仅参与对肿瘤发生和发展的调控，还参与对 的表达调控，协助肿瘤细胞产生免疫逃逸。又称为表面抗原分化簇 （，）或 同源体（），可以表达在胎盘滋养层细胞、心肌内皮细胞及骨骼肌等实质器官组织，也可以表达在活化的 淋巴细胞、淋巴细胞、单核细胞等免疫细胞上。的受体为免疫球蛋白超家族激活诱导的型跨膜受体 （家族成员），表达于活化的 淋巴细胞、淋巴细胞、髓系细胞等免疫细胞上。与 结合发挥负性免疫调控作用，控制免疫反应程度和规模。然而研究表面，包括膀胱癌在内的多种实体肿瘤表面表达 ，与肿瘤浸润性淋巴细胞表面 结合，可 抑 制 淋 巴 细 胞 免 疫，促 进 肿 瘤 免 疫 逃逸 。本研究结果显示，膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织 阳性率为 ，高于类似研究结果 ，可能与肿瘤标本类型、抗体类型、检测平台、阈值设定等因素有关 。进一步分析 与 的相关性发现，膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织 与 表达呈正相关。这与既往在肺腺癌及自然杀伤细重庆医学 年月第 卷第期胞（）细胞淋巴瘤中的研究结论一致，说明膀胱癌中 、可能在同一信号通路上，可能是 的靶基因之一。此外，分析 、表达与膀胱高级别浸润性尿路上皮癌患者临床病理资料的关系发现，、在膀胱高级别浸润性尿路上皮癌组织中的表达与患者肿瘤分期有关，、期膀胱癌组织 、多为阳性表达，说明二者可能同时参与了肿瘤的侵袭过程，至于有无协同效应，还需进一步证实。综上 所 述，高 级 别 浸 润 性 尿 路 上 皮 癌 组 织 、呈 高 表 达，且 二 者 呈 正 相 关，可能参与了 的表达调控。临床应用中联合 、检测，可能在患者预后评估、药物疗效预测方面有新的应用价值，同时本研究也给 抑制剂联合 靶向治疗提供了一定的理论依据。参考文献 ，：，（）：焦阳，冯对平肌层浸润性膀胱尿路上皮癌的治疗进展现代肿瘤医学，（）：张凡，李彦佑，史正奇，等 抑制剂治疗膀 胱 癌 的 研 究 进 展 中 华 外 科 杂 志，（）：，：，：杨蕾伊，林桑，谢其冰，等 抗肿瘤 和 治疗现状与免疫相关不良反应的机制探索 中国全科医学，（）：，陈越，季鸣，陈晓光 与肿瘤关系的研究进展 药学学报，（）：钟彬龙，邵增务 在骨肉瘤中的研究进展华中科技大学学报（医学版），（）：董秋霞，潘贤英，尚春香，等 和 蛋白在肺腺癌术后组织中的表达及临床意义 现代肿瘤医学，（）：张芬，罗东兰，陈玉，等 和 在结外 细胞淋巴瘤中的表达及意义 中华病理学杂志，（）：刘月平 国际乳腺癌 工作组 评估更新的主要内容解读中华病理学杂志，（）：国家病理质控中心，中华医学会病理学分会，中国临床肿瘤学会肿瘤病理专家委员会 实体肿瘤 免疫 组 织 化 学 检 测 专 家 共 识（版）中华病理学杂志，（）：黄文斌，程亮 膀胱浸润性尿路上皮癌组织学亚型及其分子病理学研究进展 中华病理学杂志，（）：陈森镇，陈诺琦，陈锦凤 和 在甲状腺癌中的表达及临床诊断意义新医学，（）：吴朝，董自强 及其抑制剂在膀胱癌中的研究进展东南大学学报（医学版），（）：，（）：吴雅珣，张邢松，郑桂华膀胱尿路上皮癌中 和 的表达及临床意义临床与实验病理学杂志，（）：，（）：张国强，罗全勇 免疫检查点在甲状腺疾病中的作用 中华核医学与分子影像杂志，（）：白钰明，张国文，马可为，等 浸润性膀胱癌分子分型的预后研究及 的表达意义 临床泌尿外科杂志，（）：，：，（）：中华医学会病理学分会泌尿与男性生殖系统疾病病理专家组 膀胱浸润性尿路上皮癌 （）免疫组织化学检测病理专家共识中华病理学杂志，（）：骆新兰，罗陆侨，何娇，等免疫组织化学检测条件对 （）染色结果的影响中华病理学杂志，（）：（收稿日期：修回日期：）重庆医学 年月第 卷第期