花园葱蜗牛检疫鉴定方法 GBT 33122-2016.pdf

1CS65.020.01B16中华人民共和国国家标准GB/T33122一2016花园葱蜗牛检疫鉴定方法Detection and identification of Cepaea hortensis(Muller,1774)2016-10-13发布2017-05-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T3312220164基本信息学名：Cepaea hortensis(Muller,1774)。异名：Helix hortensis Muller,1774。英文名：White-lipped banded snail,White-lipped grove snail,White-lipped garden snail,分类地位：软体动物门Mollusca,腹足纲Gastropoda,.柄眼目Stylommatophora,大蜗牛科Helicidae,葱蜗牛属Cepaea Held,1837。花葱蜗牛的近似种有森林葱蜗牛C,nemoralis(Linnaeus,1758)、维也纳葱蜗牛C.vindobonensis(Pfeiffer,1828)。5方法原理花园葱蜗牛昼伏夜出，常隐截在人们难以发现的地方，易于传播。其传播特点是不需要特定的寄主，凡接触过地面的物品都可能传播。传播方式和传播途径是确定现场检疫方式的依据。贝壳形态、软体解剖和分子特征是实验室鉴定的主要依据。6器具与试剂6.1器具休视显微镜、放大镜、手电筒、塑料自封袋、广口标本瓶、4m孔径土壤筛、小铁铲、游标卡尺、搪瓷盘、培养皿、剖针（直径0.15mm)、镊子、剪刀、小剪刀、显微镊子、显微剪刀、解剖腊盘、标签、移液枪、微型离心机、PCR仪、1.5mL离心管、0.2 mL PCR反应管、恒温金属浴，6.2试剂除另有规定外，所有试剂均为分析纯。75%乙醇、无水乙醇、硫酸镁，动物基因组DNA提取试剂盒、PCR反应液，ddHO。7现场检测对来自疫区（参见附录A)的运输工具和货物实施重点查验。仔细检查运输工具、木质包装物、未经加工的植物性材料、苗木、花卉、盆景、废塑料等是否有蜗牛附着其上，花园葱蜗牛昼伏夜出，尤其要注意阴暗截光处的检查，用手电筒仔细寻找蜗牛的行迹。蜗牛爬行过后，会留下银灰色的些带状黏液痕迹，这是判定是否有蜗牛污染的重要依据。发现蜗牛，随时装入塑料自封袋或标本瓶，带回实验室做进一步的检验鉴定。发现盆景等携带土壤或其他细碎衬垫材料时，需过筛检查是否有卵或幼螺。8实验室鉴定8.1测量观察和软体解剖用游标卡尺测量蜗牛贝壳的壳高和壳宽、卵粒长和宽。用肉眼或放大镜或体视显微镜仔细观察卵和螺的形态特征。将闷杀（见10.1）处理后的标本，参照SN/T3067解剖软休，分离出生殖系统。