黑高粱检疫鉴定方法 GBT 36832-2018.pdf

GB/T368322018种难以区别。其小穗（小花、颗果）形态区别见附录B。4仪器和用具4.1仪器设备体视显微镜(1040)、放大镜、孔筛（孔径5.0m、3.5mm、2.5mm、1.5mm、1.0mm)、PCR仪、电子天平(110000g)、pH计、冷冻混合研磨仪、电泳仪、凝胶成像系统、高速冷冻离心机、解剖镜、涡旋振荡器、冰箱、微波炉。4.2用具白瓷盘、我玻片、解剖刀、解剖针、摄子、培养皿、指形管、标本盒、标本瓶、标签、樟脑、干燥剂、可周式微量移液器(2L、10L、20L、100L、200L,1000L)及相应的吸头、微型离心管、PCR管、直径3.0mm的灭茵钢珠等。4.3主要试剂植物基因组提取试剂盒、DNA纯化试剂盒、超纯水，DNA Mark，琼脂糖，核酸凝胶染料、液氨、脱氧核糖核苷三磷酸(dNTPs).、Taq聚合酶、10XPCR缓冲液。CTAB法提取试剂，见附录C中C.1。5实验室检测和鉴定5.1样品检测5.1.1粮谷类、油籽类直径大于或等于5.0mm的样品，如大豆、玉米、菜豆等，建议选取孔径为的5.0mm和1.5mm的圆孔筛，双层筛样：直径在2.5mm5.0mm的样品，如大麦、小麦、亚麻籽、高粱等，可采用3.5mm和2.5mm圆孔筛，双层筛样：如直径小于或等于2.5mm的样品，如芝麻，油菜籽等，可采用2.5mm和1.0mm圆孔筛，双层筛样。分次将样品倒入上层筛中，每次样品量不超过上层筛内高度的1/2。每次筛样，同一方向近同一平面旋动10次20次。筛样完毕后，将每层筛上物和筛下物分别倒入白瓷盘中。用载玻片仔细拨动上层筛的筛上物，并用镊子将疑似黑高粱的种子（小穗）放入培养皿中，待镜检。在样品倒入白瓷盘、筛样等过程中，发现的疑似黑高粱的植株应挑出，放入白瓷盘中，待镜检。5.1.2原羊毛、落毛将原羊毛、落毛在白磁盘中展开，仔细检查混入的杂草。将疑似黑高粱的植株挑出，放入白瓷盘中，待镜检。用摄子将疑似黑高粱的种子挑出，放人培养皿中，待镜检。5.1.3集装箱残留物将集装箱残留物倒人白瓷盘中，摊平，仔细检查。将疑似黑高粱的植株挑出，放人白瓷盘中，待镜检。用载玻片仔细拨动，并用摄子将疑似黑高粱的种子（小穗）挑出，放入培养皿中，待镜检。