茶叶中茶黄素的测定 高效液相色谱法 GBT 30483-2013.pdf

GB/T30483-2013人500mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。5.9液相色谱流动相5.9.1流动相A:分别将90mL乙腈(5.2)，20mL冰乙酸(5.4)，2 mL EDTA-2Na(5.6)加入1L容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。溶液需过0.45m膜。5.9.2流动相B:分别将800mL乙腈(5.2)，20mL冰乙酸(5.4)，2 mL EDTA-2Na(5.6)加入1L容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。溶液需过0.45m膜。5.10标准储备溶液5.10.1咖啡诚储备溶液：2.00mg/mL。5.10.2没食子酸(GA)储备溶液：0.100mg/mL。5.10.3儿茶素储备溶液：+C1.00mg/mL,EC1.00mg/mL,EGC2.00mg/mL,EGCG2.00mg/mL,ECG 2.00 mg/mL5.10.4茶黄素储备溶液：TF2.00mg/mL,TF-3-G2.00mg/mL,TF-3-G2.00mg/mL,TFDG2.00mg/m。5.11标准工作溶液：用稳定溶液(5.8)配制。标准工作溶液的浓度：没食子酸5g/mL25g/mL、咖啡减50g/mL150g/mL、+C50g/mL150g/mL、EC50g/mL150g/mL、EGC100g/mL300g/mL、EGCG100ug/mL400g/mL、ECG50g/mL200g/mL、TF100ug/mL300g/mL、TF-3-G100g/mL300g/mL、TF-3-G100g/mL300g/mL、TFDG100g/mL300g/mL。6操作方法6.1取样按GB/T8302的规定。6.2试样制备按GB/T8303的规定。6.3测定步骤6.3.1干物质含量测定按GB/T8303的规定。6.3.2供试液的制备6.3.2.1茶叶：称取0.2g(精确到0.0001g)均匀磨碎的试样(6.2)于10mL玻璃离心管中，加入在70中预热过的70%甲醇溶液(5.5)5mL,用玻鸦棒充分搅拌均匀湿润，立即移入70水浴(4.2)中，浸提10min(隔5min搅拌一次)，浸提后冷却至室温，转入离心机(4.3)在3500r/min转速下离心10mi,将上清液转移至10mL容量瓶。残渣再用5mL的70%甲醇溶液提取一次，重复以上操作。合并提取液定容至10mL,播匀（该提取液在4下可至多保存24h)。用移液管移取上述提取液2mL至10mL容量瓶中，用稳定溶液(5.8)定容至刻度，摇匀，过0,45m膜，待测。6.3.2.2速溶茶：称取0.5g(精确到0.0001g)均匀的速溶茶于50mL容量瓶，加人不高于60的水溶解，加5mL乙腈(5.2)并用水定容至刻度，摇匀。用移液管移取上述提取液2mL至10mL容量瓶中，用稳定溶液(5.8)定容至刻度，摇匀，过0.45m膜，待测。