病媒生物感染病原体采样规程 鼠类 GBT 28940-2012.pdf

GB/T28940-2012间，用左手食指摸到心搏，右手取连有3号5号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺。当针头正确刺到心脏时，鼠血由于心搏自然进入注射器，即可进行取血。5.3.4眼眶动脉和静脉采血用左手抓住鼠，拇指和食指尽量将鼠头皮肤捏紧，使鼠眼球突出。右手取直头眼科镊，在鼠右侧眼球根部将眼球摘去，并将鼠倒置，头朝下，此时眼眶内很快流血，将血滴人预先加有抗凝剂的平皿内，直到无血液流出为止。5.3.5后眼眶静脉丛连续穿刺采血取血时，手从背部捉住鼠，拇指和食指握住颈部，利用对颈部所加的压力，使头部静脉淤血，在突出的眼球旁分辨出后眼眶静脉。将消毒的吸管用抗凝剂湿润其内壁，从内测眼角将吸管转向前，并轻压刺人Ton氏筋膜，然后由朵侧眼眶壁平行地对猴头方向推进，深约4.5mm就达到后眼眶静咏丛，血液自然进人吸管内。5.3.6断头采血实验者右手握住鼠头部，左手握住背部，露出颈部，助手用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉。立即将鼠颈向下，对准已准备好的平皿（内放凝血剂），鼠血即可从颈部很快滴人容器内。5.3.7颈静脉采血将鼠仰卧固定于鼠固定板上，将一侧颈部外侧的被毛剪去，用消毒液消毒皮肤，作一般外颈静脉分离手术，颈静脉暴露清楚后，用注射器针头沿静脉平行方向刺入，抽取所需血量。5.3.8股静脉或股动脉采血大鼠可进行股静脉或股动脉采血。将鼠麻醉后，剪开腹股沟处皮肤，即可看到股静脉，把此静脉剪斯或用注射器采血即可，股动歌较深需剥离出，再采血。5.4鼠脏器及脑组织采集步骤5.4.1所用解剖用具应煮沸或高压消毒灭菌，将应用器械以剖解顺序分次排列在灭菌有盖的塘瓷盘内。整个过程在生物安全柜中进行。5.4.2鼠尸固定于解剖盘上，腹部向上，用消毒液消毒腹部皮肤。5.4.3以镊子提起耻骨缝前面的皮肤，用剪刀剪开。并沿正中线直剪到下颌部。然后用纯头剪刀或刀柄利离皮肤，再把皮肤向四肢剪开，翻转皮肤。剪开腹壁前先用碘酊或酒精消毒。5.4.4用无菌剪刀沿正中线自阴部至丽肌为止剪开再行横切开，并切取肝、脾、肾等脏器放入冻存管中，保存在低温冰箱或加保存液保存。5.4.5另换灭菌剪刀，切开隔肌，剪斯胸骨两侧软肋骨（呈倒V型），翻起胸骨，再切取心脏和肺脏放入冻存管，保存在低温冰箱中或加保存液保存。5.4,6取脑组织时，固定头部，用碘酊消毒，剪开头皮露出头骨。再以碘酊消毒，更换一套无菌剪、镊，沿脑部边缘剪开头骨用剪使脑与骨剥离，取出整个鼠脑放入冻存管，保存在低温冰箱中或加保存液保存。5.4.7剖解完毕，高压后按实验室垃圾处理，或将鼠尸投入焚尸炉焚化，或在75%酒精中消毒后深埋。用75%酒精处理生物安全柜台面，紫外消毒30m。所用的器械都要高压消毒。