SPF鸡 胚敏感试验 GBT 17999.6-1999.pdf

中华人民共和国国家标准GB/T17999.6-1999SPF鸡胚敏感试验SPF chicken-Embryo susceptibility test1范围本标准规定了胚敏感试验所用试剂、材料，操作程序及结果判定等。本标准适用于SP鸡感染禽脑脊髓炎病毒后的抗体监测。2原理Van Roekel毒株是禽脑脊髓炎病毒的一株胚适应毒株，具有高度嗜神经性。对非免疫鸡群的鸡胚有致病性，引起肌肉营养不良、运动性降低、足趾卷曲等特征性病变。免疫鸡群的鸡胚对经卵黄囊接种的病毒有抵抗力。3试剂和器材3.1试剂3.1.1AE-Van Roekel病毒(0.2mL含100 EIDo).3.1.2SPF蛋.3.1.3被检蛋.3.2器材3.2.11mL注射器。3.2.27针头。3.2.3恒温培养箱。3.2.4超净工作台。3.2.5小型孵化器。4操作程序4.1取被检蛋及SPF蛋孵至6日龄。4.2取6日龄被检鸡胚，每胚经卵黄囊接种0.2mL含100EID5a的AE-Van Roekel病毒液，接种完毕用蜡封孔，同时取6日龄SPF鸡胚接种与不接种病毒作为对照。4.3接种后的鸡胚，置37C37.5C孵化器中孵化，每天照蛋一次，取出死亡鸡胚，接种后第12d取出全部鸡胚待检。4,4观察病变：非免疫鸡的鸡胚感染Van Roekel后出现特征性病变，早期为胸腹部肌肉、皮下水肿，当接种后10d12d解剖活胚时，见腿肌萎缩、足趾卷曲，注意与接种、不接种SPF对照鸡胚对比规察。5结果判定5.1当接种SP对照鸡胚均呈禽脑脊髓炎病毒所致的特异病变，不接种SPF对照鸡胚无特异病变时，国家质量技术监督局1999-11-10批准2000-04-01实施16561-2.656001/a0中华人民共和国国家标准SPF鸡胚敏感试验GB/T17999.6-1999中国标准出版社出版发行北京西城区复兴门外三里河北街16号椰政编码：100045http:/电话：63787337、637874472000年3月第一版2004年11月电子版制作书号：1550661-16492版权专有侵权必究GB/T17999.6-1999举报电话：(010)68533533