SPF鸡 微生物学监测 第10部分：SPF鸡 间接免疫荧光试验 GBT 17999.10-2008.pdf
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SPF鸡
微生物学监测
第10部分：SPF鸡
间接免疫荧光试验
GBT
17999.10-2008
SPF
微生物学
监测
10
部分
间接
免疫
荧光
试验
17999.10
2008
GB/T17999.10-20084.3间接荧光抗体染色4.3.1取出抗原片室温放置10min待用。4.3.2用PBS将被检血清、阴性血清、阳性血清分别稀释成1：100、1：500两个稀释度，分别取10L滴加于抗原片各孔中。4.3.3将加样抗原片置于湿盒内，37C孵育30min。4.3.4用PBS浸洗3次，每次10min。4.3.5取20 L FITC标记抗鸡1gG滴加于上述处理过的抗原片各孔中，孵有，洗涤同前。4.3.6用级冲甘油封片，置于荧光显微镜下视察。5结果判定5.1试验成立条件CIV感染细胞制备的抗原片中，加入阳性血清，细胞核内可见清晰的黄绿色荧光颗粒：加入阴性血清，细胞核内无荧光颗粒。正常细胞制备的抗原片中，加入阳性血清，细胞核内无荧光颗粒。在以上条件成立的基础上，进行待检血清判定。5.2待检血清的判定CIAV感染细胞制备的抗原片中，加入待检血清，细胞核内可见清晰的荧光颗粒，则待检血清判为阳性。2
