蜚蠊抗药性检测方法 德国小蠊生物测定法 GBT 26352-2010.pdf

GB/T26352-2010作为敏感基线。以待测昆虫种群得到的杀虫剂毒力回归线与敏感基线对比，来确定待测种群的抗性水平。具体是比较两条毒力回归线的b值变化以及由毒力回归线计算得到的半数致死量的变化。7.2操作步骤7.2.1药膜法用丙酮或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酮或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释至一个系列浓度，通过预实验确定药剂的浓度系列范围，最低浓度时死亡率小于20%,最高浓度时大于80%。取不同浓度药剂溶液2.5mL加于500mL锥形瓶中，不断转动锥形瓶，使药液均匀分布于瓶内壁，置于通风橱中过夜，使有机溶剂全部挥发。然后每瓶放试虫10头，用纱网或纱布封口。每个浓度试验重复3次，以相应溶剂处理为对照组。24h后记录死亡数。7.2.2点滴法用丙酮或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酮或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释至一个系列浓度，通过预实验确定药剂的浓度系列范围，最低浓度时死亡率小于20%,最高浓度时大于80%。试虫用二氧化碳或乙醚麻醉，用微量点滴器将1uL杀虫剂药液点滴于雄性成虫第2、3对足基节间的胸部腹板上，以点滴相应溶剂为对照组。每个浓度试验重复3次。将处理后的试虫转入清洁容器内，供给水和食物。24h后记录死亡数。7.3死亡判断试虫不能正常爬行或完全不动视为死亡。7.4结果表述结果用抗性倍数表述，抗性倍数=待测种群LC(LD)值/敏感种群LC(LD)值。7.5判别标准敏感品系和测定样本95%置信限不重叠，且抗性倍数大于等于5倍为抗性种群。8诊断剂量法8.1原理依据药剂对敏感品系的毒力回归线，确定一个能够区分敏感个体和抗性个体或抗性杂合子的剂量。一般用2倍敏感品系的LD(LC)值作为诊断剂量。根据待检测德国小蠊种群在诊断剂量下的死亡率做为抗性判定标准。8.2操作步骤8.2.1药膜法用丙酮或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酮或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释到一定的浓度，取2.5mL溶液加于500mL锥形瓶中（锥形瓶内表面药膜的最终剂量达到诊断剂量，常见杀虫药剂对敏感德国小蠊品系的诊断剂量参见表A.1),不断转动锥形瓶，使药液均匀分布于瓶内壁，置于通风橱中过夜，使有机溶剂全部挥发。然后每瓶放试虫10头，用纱网或纱布封口。试验重复10次，以相应溶剂处理为对照组。24h后记录死亡数。2