蜂蜜中呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃唑酮代谢物残留量的测定方法 液相色谱-串联质谱法 GBT 18932.24-2005.pdf

GB/T18932.24-2005蜂蜜中呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃唑酮代谢物残留量的测定方法液相色谱-串联质谱法1范围GB/T18932的本部分规定了蜂蜜中呋喃它酮的代谢物5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮、呋喃西林的代谢物氨基脲、呋喃妥因的代谢物1-氨基-2-内酰脲和呋喃唑酮的代谢物3-氨基-2-唑烷基酮残留量液相色谱-串联质谱的测定方法。本部分适用于蜂蜜中5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基围、氨基脲、1-氨基-2-内酰脉、3-氨基-2-唑烷基翻残留量的测定。本部分的方法检出限：5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮和3氨基-2-唑烷基酮为0.2g/kg:氨基脲和1-氨基-2-内酰脲为0.5ugkg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过GB/T18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB/T6379测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性(GB/T6379-1986,neg1S05725:1981)GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一1992，neg IS03696:1987)3原理试样中残留的硝基呋喃类抗生素代谢物在酸性条件下用2-硝基苯甲醛衍生化，用Oasis HLB或相当的固相萃取柱净化。电喷雾离子化，液相色谱-串联质谱检测，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。4.2乙腈：色谱纯。4.3乙酸乙酯：色谱纯。4.4碱酸氢二钾：优级纯。4.5乙酸：优级纯。4.6二甲亚砜：优级纯。4.7盐酸：优级纯。4.8氢氧化钠：优级纯4.92-硝基苯甲醛(2-NP):含量99%。4.10磷酸氢二钾溶液：0.1mol/L。称取17.4g碱酸氢二钾(4,4)，用水溶解，定容至1000mL。4.11盐酸：0.2mol/L。量取17mL浓盐酸(4.7)用水定容至1000mL。GB/T18932.24-20054.12氢氧化钠溶液：1ol/1。称取40g氢氧化钠(4.8)，用水溶解，定容至1000mL。4.13衍生剂：含2-硝基苯甲醛0.05mo1/1。称取0.075g2-硝基苯甲醛(4.9)溶于10mL二甲亚砜(4.6),现用现配。4.14样品定容溶液：乙腈(4.2)十0.4%乙酸(4.5)水溶液(1十9)。4.15 Oasis HLB固相萃取柱或相当者：60mg,3mL。使用前分别用5mL甲醇(4.1)和10mL水预处理，保持柱体湿润。4.160.45m滤膜。4.175-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基雨、氨基脲、1-氨基-2-内酰脲和3-氮基-2-唑烷基翻标准物质：纯度99%。4.185-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮、氨基脲，1-氨基-2内酰脲和3-氨基-2-唑烷基酮标准储备溶液：1.0mg/mL,称取适量的四种硝基呋喃代谢物标准物质(4.17)，分别用甲醇配成1.0mg/mL的标准储备液。储备液避光贮存在一18冰柜中，保存期为三个月。4.195-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮、氨基脲、1-氨基-2-内酰脲和3-氨基-2-唑烷基酮混合标准工作溶液：1.0g/mL。吸取适量四种硝基呋喃代谢物的标准储各溶液(4.18)，用甲醇配成1.0g/mL的混合标准工作溶液，标准工作溶液避光心存在一18冰柜中，保存期为三个月，使用前回温到室温。4.205-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮、氨基脲、1-氨基-2-内酰脲和3-氨基-2唑烷基翻混合基质标准校准溶液：称取七个蜂蜜空白样品（称样量为4g)于50mL棕色离心管中，其中六个空白样品中分别加人适量四种硝基呋喃代谢物的混合标准工作溶液(4,19)，按照样品操作步骤同步操作。使最终样液中5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮和3-氨基-2-唑烷基酮的浓度均分别为0ng/mL,0.5ng/mL,1.0ng/mL,2.0ng/mL,5.0ng/mL,10.0ng/mL,20.0ng/mL:氨基脲、1-氨基-2-内酰脲的浓度均分别为0ng/mL,1.0ng/mL,2.0ng/mL,5.0ng/mL,10.0ng/mL,20.0ng/mL,50.0ng/mL作为基质标准校准溶液，该基质标准校准溶液即配即用。5仪器5.1液相色谱-串联四极杆质谱仪，配有电喷雾离子源。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g各一台。5.3液体混匀器。5.4固相萃取装置。5.5氮气吹干仪。5.6恒温箱。5.7真空泵：真空度应达到80kPa。5.8微量注射器：25L,100L。5.9棕色具塞离心管：25mL,50mL。5.10pH计：测量精度0.02.5.11心液器：50mL。6试样的制备与保存6.1试样的制备对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记。6.2试样保存将试样于常温下保存。