蜂蜜中林可霉素、红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 GBT 22941-2008.pdf

GB/T22941-2008蜂蜜中林可霉素、红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法1范围本标准规定了蜂蜜中林可霉素、红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素残留量液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于蜂蜜中林可霉素、红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素残留量的测定。本标准的方法检出限均为2.0g/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6379.1测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分：总则与定义(GB/T6379.1-2004,ISO 5725-1:1994,IDT)GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法(GB/T6379.2-2004,ISO5725-2:1994,IDT)GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-2008,ISO3696:1987,MOD)3原理蜂蜜中残留的林可霉素、红霉素、螺旋霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙霉素、吉他霉素、竹桃霉素用三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲溶液(pH=9)提取，过滤后，经 Oasis HLB固相萃取柱或相当的固相萃取柱净化，用甲醇洗脱并蒸干，残渣用乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液溶解，过0.2gm滤膜后，样品溶液供液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。4试剂和材料4.1水：GB/T6682,一级。4.2甲醇：色谱纯。4.3乙腈：色谱纯。4.4三羟甲基氨基甲烷(Tris):优级纯。4.5氯化钙(CaCl22H2O):优级纯。4.6乙酸铵：优级纯。1）Oasis HLB固相萃取柱是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可，如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。1GB/T22941-20084.7盐酸：优级纯。4.8淋洗液：甲醇溶液(2十3)。量取40mL甲醇(4.2)与60mL水混合。4.90.01mol/L乙酸铵溶液：称取0.77g乙酸铵(4.6)溶于1000mL水中。4.100.2mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tis)级冲溶液：称取12.0g三羟甲基氨基甲烷(4.4)和7.35g氣化钙(4.5)，放入1000mL烧杯中，加人800mL水溶解，用盐酸(4.7)调至pH值为9.0，再用水定容至1000mL.4.11定容液：乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液(3十17)。量取15mL乙腈(4.3)和85mL乙酸铵溶液(4.9)混合均匀。4.12标准物质：林可霉素(CAS:7179-49-9)、红霉素(CAS:59319-72-1)、螺旋霉素(CAS:8025-81-8)、替米考星(CAS:108050-54-0)、泰乐菌素(CAS:74610-55-2)、交沙霉素(CAS:16846-24-5)、吉他霉素(CAS:1392-21-8)、竹桃霉素(CAS:7060-74-4),纯度99%。4.130.1mg/mL标准储备溶液：准确称取适量的各标准物质(4.12)，用甲醇分别配成0.1mg/mL的标准储备溶液。该溶液在4保存，4.141.0g/mL混合标准工作溶液：吸取各标准储备溶液(4.13)0.1mL移至10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。该溶液在4保存。4.15内标物质：罗红指素(CAS:80214-83-1)、克林霉素(CAS:21462-39-5),纯度99%。4.160.1mg/L罗红毒素、克林霉素内标储备溶液：准确称取适量的罗红毒素、克林霉素标准物质(生.15)，用甲醇配成0.1mg/mL的内标储备溶液。该溶液在4C保存。4.171.0g/mL混合内标工作溶液：分别吸取罗红霉素和克林霉素内标储备溶液(4.16)0,1mL移至10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。该溶液在4C保存。4.18基质标准工作溶液：吸取不同体积混合标准工作溶液(4.14)和20L混合内标工作溶液(4.17)，用空白样品提取液配成2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL不同浓度的基质标准工作溶液。当天配制。4.19 Oasis HLB固相萃取柱或相当者：200mg,6mL。使用前依次用5mL甲醇(4.2)和10mL水活化，保持柱体湿润。4.20滤膜：0.2m。5仪器5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.3氮气浓缩仪，5.4液体混匀器。5.5贮液器：50mL.5.6真空泵：最大负压80kPa。5.7固相萃取装置。5.8吹千管：10mL。6试样的制备与保存6.1试样的制备对无结品的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶2