肥料中粪大肠菌群的测定 GBT 19524.1-2004.pdf

GB/T19524.1-2004前言本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。本标准起草单位：农业部微生物肥料质量监督检险测试中心。本标准主要起草人：曹风明、沈德龙、李俊、姜斯、李力，GB/T19524.1-2004附录A(规范性附录)培养基A.1乳糖胆盐发酵培养基蛋白陈20.0g猪胆盐5.0g乳糖10.0g0.004%溴甲酚紫水溶液25.0m蒸馏水1000mLpH值7.27.4制法：将蛋白陈、猪胆盐及乳糖溶解于蒸馏水中，校正pH,加入溴甲酚紫水溶液，然后分装试管，每管9mL,并放人一支倒置的小套管，高压灭菌115C,15min。注1：初发酵培养基。注2：粪大肠菌胖细菌发酵乳糖产酸产气使培养液由紫色变成黄色，套管内充有气体。A,2伊红美蓝琼脂培养基蛋白陈10.0g乳糖10.0g磷酸氢二钾(K:HPO,3H2O)2.0g琼脂20.0g2%伊红Y水溶液20.0mL0.65%美蓝水溶液10.0mL蒸馏水1000mpH值7.27.4制法：将蛋白陈、乳糖、磷酸氢二钾溶解于蒸馏水中，校正pH,投人琼脂并加热溶解，分装于三角瓶中，高压灭菌115、15min备用。伊红和美蓝溶液分别高压灭菌121、20min。临用时加热熔化培养基，冷却至50一55，加人无菌的伊红和美蓝溶液，摇匀，顷注平板。A.3乳糖发酵培养基蛋白陈20.0g乳糖10.0g0.004%溴甲酚紫水溶液25.0ml蒸馏水1000mpH值7.27.4制法：将蛋白陈及乳糖溶于水中，校正pH,加入指示剂，按检验要求分装3mL5mL,并放入1支倒置的小套管，高压灭菌115C、15min。2GB/T19524.1-2004附录B(规范性附录)革兰氏染色液B.1结品紫染色液甲液：结品紫2.0g乙醇(95%)20 mL乙液：草酸铵0.8g蒸馏水80 mL将结晶紫研细后，加入95%乙醇使之溶解，配成甲液。将草酸铵溶于蒸馏水中配成乙液，甲液与乙液混合，静置48h后使用。B.2卢哥氏(Lugo)碘液碘(12)1.0g碘化钾(KI)2.0g蒸馏水300m先将碘化钾溶解在少量蒸馏水(3mL5mL)中，再将碘完全溶解在碘化钾溶液中，然后加入余下的蒸馏水。置于棕色瓶中可保存数月。B.3脱色液95%的乙醇。B.4复染液0.5%的番红水溶液：取2.5g番红花，溶于100mL无水乙醇中。取番红乙醇溶液20mL,加入80mL蒸榴水，即成0.5%番红水溶液。