食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验 GB 4789.10-2010.pdf

B中华人民共和国国家标准GB4789.10-2010食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验National food safety standardFood microbiological examination:Staphylococcus aureus2010-03-26发布2010-06-01实施中华人民足共和国卫生邵发布GB4789.10-2010检样25g(mL)样品十225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰路陈大豆肉汤，均质36118h-24hBaird-Parker平板，血平板361血1平板18h24hBaird-.Parker平板18h一24h或45h一48hBHI肉汤和营养琼脂小斜面涂片染色观察溶血36118h-24h血浆凝固商试验报令图1金黄色葡萄球菌检验程序5操作步環5.1样品的处理称取25g样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪陈大豆肉汤的无菌均质杯内，8000r/min10000r/min均质1min2min,或放入盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪陈大豆肉汤的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min2min。若样品为液态，吸取25mL样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌锥形瓶（瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠)中，振荡混匀。5.2增菌和分离培养5.2.1将上述样品匀液于36土1C培养18h24h。金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长，污染严重时在10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤内呈混浊生长。5.2.2将上述培养物，分别划线接种到Bair-Parker平板和血平板，血平板36C士1C培养18h24h。Bair-Parker平板36C1C培养18h24h或45h48h。5.2.3金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板上，菌落直径为2mm3mm,颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明园。用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菊落；但无混浊带及透明因。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿润、金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶血圈。挑取上述菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。5.3鉴定5.3.1染色镜检：金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽胞，无荚膜，直径约为0.5m1m。5.3.2血浆凝固酶试验：挑取Baird-Parker平板或血平板上可疑菌落1个或以上，分别接种到5mLBHI和营养琼脂小斜面，36C士1C培养18h24h。取新鲜配置兔血浆0.5mL,放入小试管中，再加入BH1培养物0.2mL0.3mL,振荡摇匀，置2