食品安全国家标准 食品中维生素B1的测定 GB 5009.84-2016.pdf

GB5009.84-20163.2.7乙酸钠溶液(2.0mol/L):称取27.2g乙酸纳，用水溶解并定容至100mL,摇匀。3.2.8混合酶溶液：称取1.76g木瓜蛋白酶、1.27g淀粉酶，加水定容至50mL,涡旋，使呈混悬状液体，冷藏保存。临用前再次摇匀后使用。3.3标准品维生素B标准品：盐酸硫胺素(CzH,CN,OSHC),CAS:67-03-8,纯度99.0%。3.4标准溶液配制3.4.1维生素B,标准储备液(500g/L):准确称取经五氧化二磷或者氯化钙干燥24h的盐酸硫胺素标准品56.1mg(精确至0.1mg),相当于50mg硫胺素、用0.01mol/L盐酸溶液溶解并定容至100mL,摇匀。置于04冰箱中，保存期为3个月。3.4.2维生素B标准中间液(100g/mL):准确移取2.00mL标准储备液，用水稀释并定容至100m,摇匀。临用前配制。3.4.3维生素B标准系列工作液：吸取维生素B标准中间液0L、50.0L、100L、200L、400L,800L,1000,用水定容至10mL,标准系列工作液中维生素B的浓度分别为0g/mL,0.0500g/mL,0.100g/mL,0.200g/mL,0.400g/mL,0.800g/mL,1.00g/mL。临用时配制。4仪器和设备4.1高效液相色谱仪，配置荧光检测器，4.2分析天平：感量为0.01g和0.1mg。4.3离心机：转速4000r/min,4.4pH计：精度0.01。4.5组织捣碎机（最大转速不低于10000r/min)。4.6电热恒温干燥箱或高压灭菌锅。5分析步骤5.1试样的制备5.1.1液体或固体粉末样品：将样品混合均匀后，立即测定或于冰箱中冷藏。5.1.2新鲜水果、蔬菜和肉类：取500g左右样品（肉类取250g),用匀浆机或者粉碎机将样品均质后，制得均匀性一致的匀浆，立即测定或者于冰箱中冷冻保存。5.1.3其他含水量较低的固体样品：如含水量在15%左右的谷物，取100g左右样品，用粉碎机将样品粉碎后，制得均匀性一致的粉末，立即测定或者于冰箱中冷藏保存。5.2试样溶液的制备5.2.1试液提取称取3g一5g(精确至0.01g)固体试样或者10g一20g液体试样于100L锥形瓶中（带有软质塞子)，加60mL0.1mol/L盐酸溶液，充分摇匀，塞上软质塞子，高压灭菌锅中121保持30min。水解结束待冷却至40以下取出，轻摇数次：用pH计指示，用2.0mol几乙酸钠溶液调节pH至4.0左右，加入2.0mL(可根据酶活力不同适当调整用量)混合酶溶液，摇匀后，置于培养箱中37过夜（约16h):将酶解液全部转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，离心或者过滤，取上清液备用。