食品安全国家标准 食品微生物学检验 诺如病毒检验 GB 4789.42-2016.pdf

GB4789.42-20163.3过程控制病毒：制备见附录C。3.4外加打扩增控制RNA:制备见附录D。3.5Tris/甘氨酸/牛肉府(TGBE)缓冲液：见E.2.2。3.65PEG/NaCI溶液(500g/L聚乙二醇PEG8000,1.5mol/L NaCl):见E.2.3.3.7磷酸盐缓冲液(PBS):见E.2.4。3.8氣仿/正丁醇的混合液：见E,2.5。3.9蛋白酶K溶液：见E.2.6。3.1075%乙醇：见E.2.7。3.11 Trizol试剂：见E.2.8。4检验程序诺如病毒检验程序见图1。便质表面食品100cm软质水果和生食蒸菜25g贝类消化集2.0g加入过程控制病毒病毒提取NA提取和纯化加入外加扩增控制RNA实时荧光RT-PCR空白对照阴性：阴性对照阴性：确保实数有效阳性对照阳性：提取效率1%：报告抑制指数200.图1诺如病毒检验程序5操作步璟5.1病毒提取注：样品处理一般应在4以下的环境中进行运输。实验室接到样品后应尽快进行检测，如果暂时不能检测应将样品保存在一80冰箱中，试验前解冻。样品处理和PCR反应应在单独的工作区域或房间进行，每个样品可设置23个平行处理.5.1.1软质水果和生食蔬菜5.1.1.1将25g软质水果或生食蔬菜切成约2.5cm2.5cm2.5cm的小块（如水果或蔬菜小于该体积，可不切)。5.1.1.2将样品小块移至带有400mL网状过滤袋的样品袋，加入40 mL TGBE溶液（软质水果样品，2