食品安全国家标准 食品中氨基酸态氮的测定 GB 5009.235-2016.pdf

GB5009.235-2016食品安全国家标准食品中氨基酸态氨的测定1范围本标准规定了酱油、酱、黄豆酱中氨基酸态氮的测定方法。本标准第一法适用于以粮食和其副产品豆饼、麸皮等为原料酿造或配制的酱油，以粮食为原料酿造的酱类，以黄豆、小麦粉为原料酿造的豆酱类食品中氨基酸态氮的测定：第二法适用于以粮食和其刷产品豆饼、麸皮等为原料酿造或配制的酱油中氨基酸态氨的测定。第一法酸度计法2原理利用氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，用氢氧化钠标准溶液滴定后定量，以酸度计测定终点。3试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂3.1.1甲醛(36%38%)：应不含有聚合物（没有沉淀且溶液不分层）。3.1.2氢氧化钠(NaOH)。3.1.3酚酞(CwHO)。3.1.4乙醇(CH,CH,OH)。3.1.5邻苯二甲酸氢钾(HOOCC6H,COOH):基淮物质。3.2试剂配制氢氧化钠标准滴定溶液c(NaOH)=0.050mol/L:经国家认证并授予标准物质证书的标准滴定溶液或配制方法如下：a)酚酞指示液：称取酚酞1g,溶于95%的乙醇中，用95%乙醇稀释至100mL,b)氢氧化钠溶液氢氧化纳标淮滴定溶液c(NaOH)=0.05mol/L:称取110g氢氧化纳于250mL的烧杯中，加100mL的水，振摇使之溶解成饱和溶液，冷却后置于聚乙烯的塑料瓶中，密塞，放置数日，澄清后备用。取上层清液2.7L,加适量新煮沸过的冷蒸馏水至1000L,摇匀。c)氢氧化钠标准滴定溶液的标定：准确称取约0.36g在105110干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢伊，加80L新煮沸过的水，使之尽量溶解，加2滴酚酞指示液(10g/1),用氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红色，30$不褪色。记下耗用氢氧化钠溶液毫升数。同时做空白试验。GB5009.235-2016d)计算：氢氧化纳标准滴定溶液的浓度按式(1)计算：c=W,-V.)X0.20424（】）式中：c一氢氧化钠标准滴定溶液的实际浓度，单位为摩尔每升(o/1):1基准邻苯二甲酸氢钾的质量，单位为克(g):V氢氧化钠标准溶液的用量体积，单位为毫升(L):V:空白实验中氢氧化钠标准溶液的用量体积，单位为毫升(L);0.2042一与1.00mL氢氧化钠标准滴定溶液c(NaOH)=1.000mol/L相当的基准邻苯二甲酸氢钾的质量，单位为克(g)。4仪器和设备4.1酸度计（附磁力搅拌器）。4.210mL微量碱式滴定管，4.3分析天平：感量0.1mg。5分析步骤5.1酱油试样称量5.0g(或吸取5.0mL)试样于50mL的烧杯中，用水分数次洗入100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀后吸取20.0mL置于200mL烧杯中，加60mL水，开动磁力搅拌器，用氢氧化纳标准溶液c(NaOH)=0.050mol/L滴定至酸度计指示pH为8.2，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数，可计算总酸含量。加人10.0mL甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液继续滴定至pH为9.2，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数。同时取80mL水，先用氢氧化钠标准溶液c(NaOH)=0.050mo/L调节至pH为8.2，再加入10.0mL甲醛溶液，用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至pH为9.2,做试剂空白试验。5.2酱及黄豆酱样品将酱或黄豆酱样品搅拌均匀后，放入研钵中，在10内迅速研磨至无肉眼可见颗粒，装入磨口瓶中备用。用已知重量的称量瓶称取搅排均匀的样品5.0g,用50mL80左右的蒸馏水分数次洗入100mL烧杯中，冷却后，转入100L容量瓶中，用少量水分次洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中，并加水至刻度，混匀后过滤。吸取滤液10.0mL,置于200mL烧杯中，加60mL水，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准溶液c(NaOH)=0.050mol/L滴定至酸度计指示pH为8.2，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数，可计算总酸含量。加人10.0L甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液继续滴定至pH为9,2，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数。同时取80mL水，光用氢氧化纳标准溶液c(NaOH)=0.050mol/L调节至pH为8.2，再加入10.0mL甲醛溶液，用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至pH为9,2，做试剂空白试验。6分析结果的表述试样中氨基酸态氨的含量按式(2)或式(3)进行计算：x,=Y-=V)c0.014100m X V3/V